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客服:13512172575 QQ:1745420292片工作中,为了防止长时间浸泡或者冲洗造成切片从玻片上脱落,一般要对载玻片进行防脱处理。根据防脱剂的不同,大致分为4种方法。
(1)蛋白甘油。这种方法试剂配制简单,操作迅速,并且可以立即裱片。但是,蛋白甘油不耐高温,而且会干扰免疫组化等检测的背景,目前只有传统的染色法如HE染色、Giemsa染色等还在常规使用。
(2)明矾明胶。这种方法也十分简便实用,不仅用于传统染色,而且能够用于免疫组化、原位杂交等检测。目前实验室大多数时候可以常规用该防脱剂。该方法的美中不足是在pH值高于8.0的碱性环境中加温到80度以上,切片还是容易脱落。
(3)APES。该试剂需要用丙酮稀释(丙酮有导致肝硬化的作用),注意人身防护。该方法可以通过浸泡一次处理几百张片子,但要求玻片洗得相当干净,因此清洁的工作量并不小。该方法弥补了部分高温碱性溶液脱片的问题。
(4)L-多聚赖氨酸。这种方法相当昂贵。但是,如果进行高压碱性修复,可能总体上效果是最佳的。普通组化实验和免疫组化酸性修复(大多数的情况)没有必要常规使用。上海甄准生物科技有限公司
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文献和实验1、载玻片的处理:抗原修复过程中,由于高温、高压、辐射等诸多因素的影响,极易造成脱片。为保证试验的正常进行,可选用ZLI-9001 APES、ZLI-9003 HistogripTM或ZLI-9005 Poly-L-Lysine等几种试剂,对已清洗的载玻片进行处理。具体方法如下:1.1 APES:现用现配。将洗净的玻片放入以1:50比例丙酮稀释的APES中,停留20~30秒钟,取出稍停片刻,再入纯丙酮溶液或蒸馏水中涮去未结合的APES,置通风橱中晾干即可。用此载玻片捞片时应注意组织要一步
1 原因 (1) 附贴蜡片未及时烘烤或烤片时间不足. (2) 附贴切片不平. (3) 苏木精反蓝的氨水浓度过高. (4) 洗片时水流过急. (5) 脱蜡二甲苯过凉. (6) 切片过厚. (7) 组织固定、脱水、透明浸蜡等任一过程欠佳. (8) 载玻片有油污等. (9) 有特殊的组织. 2 处理方法
相信很多朋友都经历过临床数据缺失,看着一个个空白的格子束手无策。 其实在临床试验中,病例脱落导致数据缺失是十分常见且难以避免的。在尽量避免不必要的数据缺失的同时,还应掌握了相应的缺失数据处理方法。 一、为什么会产生「缺失数据」? 临床试验中的缺失数据一般是由于受试对象在试验中因依从性差、不良事件或疗效不佳等原因提前退出试验造成的; 也可能是因为采集标本或测量过程中因样本量不足或灵敏度不够所造成的疗效指标缺失; 也可能是在数据记录或整理过程中造成的数据丢失等。 二、缺失
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