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- invitrogen
- 美国
- AM5795/1 kit
- 2025年07月12日
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- 英文名：
pMIR-REPORT™ miRNA 表达报告基因载体系统
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- 供应商：
嵘崴达
- CAS号：
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–70°C
- 规格：
1 kit
pMIR-REPORT™ miRNA 表达报告基因载体系统
货号: AM5795
产品概述
Ambion™ pMIR-REPORT™ miRNA 表达报告基因载体系统用于测量细胞中的 miRNA 表达。包含两个哺乳动物表达载体—一个用于克隆 miRNA 靶点和评价 miRNA 调节，另一个用于标准化转染效率。
•克隆 miRNA 靶点和评价 miRNA 调节
•筛选推定的 miRNA 靶序列
•包括报告基因和对照载体
pMIR-REPORT™ miRNA 表达报告基因载体系统提供 miRNA 表达的准确、定量、细胞内测量。该经验证报告基因系统包含两种哺乳动物表达载体。pMIR-REPORT™ 荧光素酶 miRNA 表达报告基因载体包含在哺乳动物启动子/终止子系统控制下的萤火虫荧光素酶，荧光素酶翻译序列下游的 miRNA 靶克隆区域。该载体针对克隆 miRNA 靶点和评价 miRNA 调节进行了优化。提供第二种载体 pMIR-REPORT™ β-半乳糖苷酶报告基因对照载体用于标准化转染效率。
应用：
pMIR-REPORT™ 荧光素酶设计用于克隆和检测推定的 miRNA 结合位点。pMIR-REPORT™ 荧光素酶可转染至哺乳动物细胞以评价内源性 miRNA 表达，或用于分别评价 Pre-miR™ miRNA 分子或 Anti-miR™ miRNA 抑制剂分子的转染导致的上调或下调。
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文献和实验，目标靶mRNA降解导致表达水平的下降，而第二个实验中荧光素酶转录本仅仅下降1.2倍，这种目的基因表达水平下看起来象源于miRNA介导的翻译抑制降，而不是siRNA介导的影响mRNA的稳定性导致。实验表明：siRNA可能以miRNA的方式作用于mRNA。实验人员还进行了另一个实验：改变第二个实验中的不匹配环的碱基序列看起来不影响抑制效果，但是siRNA和报告基因上的结合位点的匹配程度越高抑制效果越好，增加siRNA的量，抑制效果越好――这一点和抑制的情况一样――唯一不同的是：完全匹配的结合
型启动子（CMV、Ubi等）终止转录的情况。载体系统也分多种，包括慢病毒载体、腺病毒载体、质粒载体等。瞬时过表达方式主要是经过人工化学修饰的运用化学方法合成的双链RNA，能模拟细胞中内源性成熟miRNA的高水平表达，以增强内源性miRNA的调控作用，进行功能获得性研究。只需直接转染进入细胞，即可检测功能变化，快速，方便。miRNA靶位点鉴定：目前最为常用的miRNA靶位点鉴定方法是荧光素酶报告基因法。其基本原理是首先构建荧光素酶表达载体，将希望鉴定的miRNA靶基因的3′UTR构建到荧
靶基因时，想必你的内心一定是奔溃的～～～所以本宫今天极力推荐 mirDIP，它既支持多 miRNAs 预测靶基因，也支持多 mRNAs 预测 miRNA。本宫其实不太理解其它数据库为何没有这项功能，个人觉得实现起来应该并不复杂。难道是因为怕大家输入不对 miRNA 的名称？所以限定只能输入一个，这样系统可以自动匹配标准名称？或者直接像 StarBasev 那样做成下拉菜单～mirDIP 是需要输入 miRNA 标准名称的 ，对 miRNA 命名还不太熟悉的小伙伴可以看下这篇文章 miRNA 的名字
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