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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期:
1年
- 英文名:
Triquick Reagent (Trizol Substitute)
- 库存:
大量
- 供应商:
Solarbio
- CAS号:
-
- 保存条件:
4℃避光保存,
- 规格:
100ml/500ml
| 规格: | 100ml | 产品价格: | ¥400.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 500ml | 产品价格: | ¥1500.0 |
产品简介:
本试剂是一种通用的总RNA提取试剂,适用于动植物细胞或组织及细菌的总RNA抽提,可有效防止RNA在提取过程中的降解。获得的RNA可直接用于Northern杂交,纯化mRNA,体外翻译,RNase保护实验,RT-PCR以及cDNA克隆等一系列操作。该试剂可用于100次总RNA提取(10平方厘米细胞或100mg组织)。
操作说明:
自备新开封或专用氯仿,异丙醇,75%乙醇,DEPC处理水。
1. 细胞裂解或组织匀浆:
1)贴壁细胞:吸尽培养液,每10平方厘米(6孔板孔或35 mm平皿)细胞加入1 ml TriQuick Reagent,使其覆盖培养细胞,再用吸管或加样器吹打2~3次,细胞应完全裂解,然后转移至离心管中。
2)悬浮细胞:离心收集细胞,吸尽液体,每五百万至一千万(5×106-1×107)动植物或酵母细胞,或一千万 (1×107)细菌,加入1ml TriQuick Reagent 。用吸管或加样器吹打,使其完全裂解。某些酵母和细菌如裂解不充分,可用匀浆器匀浆,以确保其完全裂解。转移至离心管中。
3)组织:先将组织剪切成小块,放入玻璃匀浆器内。冷冻组织可在研钵中研磨匀浆。每50-100mg组织加入1ml TriQuick Reagent ,匀浆至完全裂解。转移至离心管中。

裂解产物应呈澄清的透明粘稠液体。室温放置5分钟。对于多糖、蛋白等杂质丰富的组织样品,匀浆后仍会存留有不溶物质,可12000g 4℃离心10分钟,然后吸取上清至一新的离心管中。
2. 分离:在装有裂解物的离心管中加入0.2倍体积的氯仿(1 ml TriQuick Reagent 加入0.2 ml氯仿),振荡器上充分振荡混匀30秒,室温放置2-3分钟。12000g 4℃离心10分钟,然后吸取含总RNA的上层水相至一新的离心管中,每毫升TriQuick Reagent 约可吸取0.5-0.6 ml。有机相和中间层含有DNA和蛋白质,应避免触及。
3. 沉淀:按每毫升TriQuick Reagent 加入0.5 ml异丙醇,颠倒数次混匀,室温沉淀10分钟。12000g 4℃离心10分钟,在管底可见RNA沉淀。弃上清,按每毫升TriQuick Reagent 加入1 ml 75%乙醇,轻轻颠倒混匀,以清洗RNA沉淀。12000g 4℃离心2分钟,弃去液体,小心勿丢弃RNA沉淀。室温倒置晾干5~10分钟。
4. 溶解:加入适量DEPC处理水使RNA沉淀溶解。存放于-80℃。
注意事项:
1,RNA提取过程中所用器皿、离心管、吸头等应保证无污染无RNA酶。操作中应小心,防止外源性RNA酶污染样品导致RNA样品降解。 2,试剂中含有酚等有害物质,注意个人防护。
参考文献:
《Pro-apoptotic effect of TRAIL-transfected endothelial progenitor cells on glioma cells》 作者:Xin Deng,Wen Zhao,Laijun Song,Wei Ying,Xinbin Guo 期刊:Oncology Letters 影响因子:0.237 PMID:29545899
《Expression of estrogen receptor, androgen receptor, and progesterone nuclear receptor in sheep uterus during the estrous cycle》 作者:Hongwei Duan, Longfei Xiao, Junjie Hu, Yong Zhang, Xingxu Zhao, Wenbo Ge, Yuting Jiang, Liangli Song, Shanshan Yang, Wenze Luo 期刊:Reproduction in Domestic Animals 影响因子:1.638 PMID:31188500
《Profile of melatonin and its receptors and synthesizing enzymes in cumulus–oocyte complexes of the developing sheep antral follicle—a potential estradiol-mediated mechanism》 作者:Longfei Xiao, Junjie HuEmail authorView ORCID ID profile, Liangli Song, Yong Zhang, Weitao Dong, Yuting Jiang, Quanwei Zhang, Ligang Yuan and Xingxu Zhao 期刊:Reproductive Biology and Endocrinology 影响因子:2.852 PMID:30606208
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文献和实验本制品是一种快速方便的总RNA提取试剂,可以从动物组织、植物材料、各种微生物、培养细胞等中提取总RNA。样品在RNAiso Reagent中能够充分被裂解,在加入氯仿离心后,溶液会形成上清层、中间层和有机层(下层),RNA分布在上清层中,收集上清层后,经异丙醇沉淀便可以回收得到总RNA。RNAiso Reagent具有很强的广谱性,可以适用于各种样品的总RNA提取,提取过程方便快速,整个操作在一小时内便可以完成。经本制品提取的总RNA纯度高,基本不含蛋白质及基因组 DNA,提取的RNA可以直接
TaKaRa RNAiso Reagent(Total RNA提取试剂)
本制品是一种快速方便的总RNA提取 试剂 ,可以从动物组织、植物材料、各种微生物、培养细胞等中提取总RNA。样品在RNAiso Reagent中能够充分被裂解,在加入氯仿离心后,溶液会形成上清层、中间层和有机层(下层),RNA分布在上清层中,收集上清层后,经异丙醇沉淀便可以回收得到总RNA。 RNAiso Reagent具有很强的广谱性,可以适用于各种样品的总RNA提取,提取过程方便快速
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