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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
保存在-20℃(酶附件),常温(RT)(其它试剂),1年。
- 保质期:
保存在-20℃(酶附件),常温(RT)(其它试剂),1年。
- 英文名:
Plasmid Extraction Mini Kit
- 库存:
999
- 供应商:
北京索莱宝科技有限公司
- 规格:
50T/100T
| 规格: | 50T | 产品价格: | ¥130.00 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 100T | 产品价格: | ¥180.00 |
本试剂盒采用碱裂解法裂解细胞,根据离心吸附柱在高盐状态下特异性地结合溶液中的DNA的原理特异性提取质粒DNA。 离心吸附柱中采用的硅基质材料能高效、专一地吸附DNA,可最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。 使用本试剂盒提取的质粒DNA可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、测序、连接和转化等试验。
使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶体上的标签。溶液Ⅰ在使用前先加入RNaseA(将试剂盒中提供的 RNaseA 全部加入),混匀,置于 2-8℃保存。如非指明,所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
操作过程如下:
1.取50-100mL细菌培养物,11000rpm离心10min,尽量吸除上清(菌液较多时可以通过多次离心将菌体沉淀收集到一个离心管中)。
2.向留有菌体沉淀的离心管中加入5mL溶液Ⅰ(请先检查是否已加入RNase A),使用移液器或旋涡振荡器彻底悬浮细菌细胞沉淀。注意:如果菌块未彻底混匀,会影响裂解导致质粒提取量和纯度偏低。
3.向离心管中加入5mL溶液Ⅱ,温和地上下翻转6-8次使菌体充分裂解。注意:混匀一定要温和,以免污染细菌基因组DNA,此时菌液应变得清亮粘稠,作用时间不要超过5min,以免质粒受到破坏。
4.向离心管中加入7mL溶液Ⅲ,立即温和地上下翻转6-8次,充分混匀,此时会出现白色絮状沉淀,此时会出现白色絮状沉淀(如菌液过多,可在此步放置5分钟,以尽可能的降解RNA)。11000rpm离心10分钟,用移液器小心地将上清转移到另一个干净的离心管中,注意尽量不要吸出沉淀。注意:溶液Ⅲ加入后应立即混合,避免产生局部沉淀。如果上清中仍有少量絮状沉淀,可再次离心取上清。
5. 将上一步上清液加入吸附柱中(吸附柱加入收集管中),室温放置2-3min,11000rpm离心30-60s,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中(如果为了提高得率,可将收集管中的液体加入吸附柱再次吸附一次)。
6. 向吸附柱中加入8mL漂洗液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),11000rpm离心2min,弃废液,将吸附柱放入收集管中。
7. 向吸附柱中加入6mL漂洗液,11000rpm离心2min,弃废液,将吸附柱放入收集管中。
8. 11000rpm离心5min,将吸附柱敞口置于室温或50℃温箱放置数分钟,目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除,否则漂洗液中的乙醇会影响后续的实验,如酶切、PCR等。
9. 将吸附柱放入一个干净的离心管中,向吸附膜中央悬空滴加1-2mL经65℃水浴预热的洗脱液,室温放置5min,11000rpm离心2min。
10. 为了增加质粒的回收效率,可将得到的洗脱液重新加入吸附柱中,室温放置5min,11000rpm离心2min。
答:您好,不建议使用D1100质粒小量提取试剂盒提取,可以选择D1110-质粒大量提取试剂盒提取。D1100小柱孔径太小,140kb极易断裂、产量极低;D1110大孔径大容量硅胶柱,相比D1100小柱,对100–150kb超长环状DNA吸附、保留能力强很多,大幅减少穿膜流失与机械剪切断裂。


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文献和实验以下操作按照天根产品 DP433 血液总 RNA 提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 新鲜血液样品( 200 μl )2. 无水乙醇,β-巯基乙醇3. 一次性无菌注射器(DNase I配置),移液器及配套RNase-Free无菌枪头(200 μl ,1ml) 1.5 ml,2.0ml 离心管(RNase-free)4. 通风橱 涡旋振荡器 金属浴 台式低温离心机本文版权归天根生化科技
以下操作按照天根产品 DP432 植物总 RNA 提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 植物样品(10-20 mg),研钵,液氮2. 无水乙醇,β-巯基乙醇3. 一次性无菌注射器(DNase I配置),移液器及配套RNase-Free无菌枪头(200 μl ,1ml) 1.5 ml,2.0ml 离心管(RNase-free)4. 通风橱 涡旋振荡器 金属浴 台式低温离心机本文版权归天
RNAsimple 总 RNA 提取试剂盒操作指南(DP419) ——植物
以下操作按照天根产品 DP419 RNAsimple 总 RNA 提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 植物叶片 研钵 液氮2. 无水乙醇 氯仿3. 移液器及配套 RNase-free 无菌枪头(200 μl ,1ml),1.5 ml,2.0ml 离心管(RNase-free)4. 涡旋振荡器,台式低温离心机实验准备-试剂盒准备:第一次使用前应在去蛋白液 RD、漂洗液 RW 中












