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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
Merck
- 英文名:
Glycogen Phosphorylase Inhibitor
- 保存条件:
2-8°c
- 库存:
1
- 规格:
1MG
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文献和实验1.一定要在lysis buffer中加入蛋白酶抑制剂,还要加入一定量的磷酸酶抑制剂,否则即使band压出来也会很浅,结果也不可信。 2.加一抗后最好4度过夜,保证抗体有充分的结合时间。因为磷酸化的蛋白只占总的蛋白量的极少部分。4度也可使一抗重复使用多次。毕竟磷酸化的抗体都挺贵的。二抗则室温1小时即可。 3.磷酸化抗体的好坏是一个关键因素,所以要选择好的厂商。个人认为,Cell signaling公司做的磷酸化抗体不错,尤其是MAPKs磷酸化抗体。 3.最好根据厂商的protocol
相关专题磷酸化蛋白的western blotting检测是信号通路研究中的经典方法。然而,有时会遇到一些问题,例如,磷酸化抗体检测不到总蛋白,不知道如何使用lysis buffer,Western blot高背景等。本文总结了论坛上的高手整理的实验操作需注意事项,供各位迷途羔羊参考。1. 一定要在lysis buffer中加入蛋白酶抑制剂,还要加入一定量的磷酸酶抑制剂,否则即使band压出来也会很浅,结果也不可信。附:lysis buffer配方 Buffer Company Cat
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