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的底物进行筛选。我们通过离体印迹磷酸化作用来确认可能的底物。总的来说,我们的方法能筛选植物蛋白激酶用于进一步的分析,随后的体内实验对评估它们的生理作用是必不可少的 [ 13,24,25 ]。2. 材料 2.1 非变性条件下重组激酶的纯化 ( 1 ) 培养细胞的培养基:含 100 μg/ml 氨苄青霉素,15 μg/ml 卡那霉素,2% 葡萄糖的 2YB 或 LB 培养基。 ( 2 ) 异丙基 β-D-硫代半乳糖苷(IPTG ) 。 ( 3 ) 非变性裂解液:300 mmol
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