还原型辅酶Ⅰ二钠,三水

Ⅰ相代谢稳定性研究原理及实验方法

等内质网的基本功能。目前，制备肝微粒体常用的方法是差速离心法。具体制备流程见下图（见图4） 图4 肝微粒体制备流程图 3.2 体外孵育体系的建立 Ⅰ相代谢稳定性研究的肝微粒体体外孵育体系，是由制备的肝微粒体辅以氧化还原型辅酶，在模拟生理温度及生理环境的条件下进行生化反应的体系。 以每个孵育体系总体积为200 µL为例，体系包括0.1M PH 7.4 的磷酸缓冲液，NADPH发生系统（1mM NADP，5 mM的6-磷酸葡萄糖，1 U/mL 6-磷酸葡萄糖脱氢酶，3.3 mM的氯

丙酮酸激酶测定介绍

丙酮酸激酶测定：包括荧光斑点试验和PK活性检测。 （1）原理：在二磷酸腺昔（ADP）存在的条件下丙酮酸激酶（PK），催化磷酸烯醇丙酮酸（PEP）转化成丙酮酸，在辅酶Ⅰ还原型（NADH）存在情况下，丙酮酸被LDH转化为乳酸医学`教育网搜集整理。若标记荧光于NADH上，此时有荧光的NADH变为无荧光的NAD. 参考值：正常荧光在20min内消失。l5.0±1.99IU/gHb（37℃）（ICSH推荐Blume法） （2）临床意义：PK严重缺乏者荧光60min不消

Ⅱ相代谢稳定性研究原理及实验方法

代谢产物或原型药物在酶的影响下与内源性小分子发生结合，使药物毒性、活性降低或极性增加而易于排出的反应。在药物的Ⅱ相代谢中，与葡萄糖醛酸的结合反应最为常见，由微粒体中的糖醛酸转移酶催化尿苷二磷酸葡萄糖醛酸（UDPGA）进行反应，形成葡萄糖苷酸，使其水溶性增加，易于排出体外。因此，在体外，如若加入肝微粒体和UGT系统，便可重建Ⅱ相代谢体系，从而进行Ⅱ相代谢稳定性研究。 3    肝微粒体体外温孵法实验方法描述 肝微粒体体外温孵法是由制备的肝微粒体辅以氧化还原型辅酶，由微粒体中的糖醛酸转移酶催化尿苷二