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- 文献和实验
- 技术资料
1、产品规格:
|
套(1×10⁶cells/T25培养瓶) |
套(1×10⁶cells/冻存管×2) |
2、商品介绍:
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细胞名称: |
SiHa-LUC-GFP:绿色荧光蛋白和荧光素酶标记的人子宫颈鳞癌细胞 |
|
种属来源: |
人 |
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组织来源: |
子宫 |
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简介: |
SiHa细胞是建自一个日本病人的外科手术的原位组织样品。电镜观察表明,在SiHa细胞连接处有典型的桥粒,在SiHa细胞胞质中有丰富的张力丝。在裸鼠中,SiHa细胞能形成低分化的表皮样癌(Ⅲ级);SiHa细胞中,癌基因PRB和p53阳性。 |
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细胞形态: |
上皮细胞样 |
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生长特性: |
贴壁生长 |
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特征特性: |
通过慢病毒感染的方式使SiHa细胞稳定表达绿色荧光蛋白和萤光素酶融合蛋白LUC-GFP,后通过嘌呤霉素抗性筛选和动物成瘤实验获得LUC-GFP表达的阳性细胞群。 |
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生物安全等级: |
2级 |
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推荐传代比例: |
0.25 %含 EDTA 胰酶,37 ℃ 2 min,干消,1:5 传,3 天长满 |
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推荐换液频率: |
2-3次/周 |
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生长培养基: |
MEM,含NEAA,HEPES+10 %FBS+1 %P/S;该细胞系为Puro抗性,可根据需要加入2 μg/mL Puromycin处理细胞。 |
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培养条件: |
温度:37 ℃;CO2:5 % |
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冻存条件: |
选用无血清无蛋白非程序细胞冻存液(含DMSO,透亮色),直接转-80度冰箱隔天后液氮保存 或者 FBS 90%+DMSO 10%(乳黄色),程序降温盒转-80度冰箱隔天后液氮保存 (细胞复苏时切记培养基稀释后再离心!!!) |
MEM培养基(Minimum Essential Medium),即最低必需培养基,也称最小基本培养基、低限量Eagle培养基,是动物细胞培养中最常用的基础培养基之一。MEM培养基仅含有12种必需氨基酸、8种维生素及基础无机盐,营养成分简单,主要用于贴壁细胞的培养,经过配方修订后也可用于其他类型细胞培养,MEM含NEAA(非必需氨基酸)的培养基,是在MEM基础上添加了7种NEAA,包括L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-天冬酰胺、L-天冬氨酸、L-脯氨酸、L-丝氨酸及甘氨酸,能降低细胞培养时细胞自身合成非必需氨基酸的副作用,有效促进细胞增殖代谢,本产品含多类细胞培养所需的氨基酸、维生素、无机盐等成分,不含蛋白质或生长因子,需根据细胞种类添加血清或无血清添加物使用。
胎牛血清是细胞培养中用量最大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成份,常用于动物细胞的体外培养,具有极为重要的功能。本产品为标准胎牛血清,已经过热灭活处理及过滤除菌,使用前无需进行热灭活,低温缓慢解冻后即可使用。
3、图片展示:

4、STR鉴定-STR位点信息:
|
D5S818 |
9 |
FGA |
21 |
|
D13S317 |
11 |
D2S1338 |
24 |
|
D7S820 |
10 |
D21S11 |
29,31 |
|
D16S539 |
12 |
D18S51 |
15 |
|
VWA |
14,17 |
D8S1179 |
13,16 |
|
TH01 |
6,9 |
D3S1358 |
16,17 |
|
AMEL |
X |
D6S1043 |
18 |
|
TPOX |
8 |
PENTAE |
10,12 |
|
CSF1PO |
12 |
D19S433 |
14.2 |
|
D12S391 |
19,22 |
PENTAD |
9,12 |
5、储存运输:
细胞:T25培养瓶常温运输;冻存管干冰运输,液氮保存。
培养基:常温运输,2-8 ℃保存,有效期12个月。
6、注意事项:
1.优先推荐复苏细胞,7-8月复苏细胞加冰袋发货,12-2月复苏细胞加暖宝宝发货。
2.收到T25培养瓶寄送的细胞时,请及时检查外包装是否完好,细胞培养瓶是否损坏、漏液,培养基是否浑浊,如有请尽快联系。
3.收到冻存管寄送的细胞时,请及时查看泡沫盒内是否还有干冰,冻存管内细胞是否是冻存状态,如无特殊情况请及时解冻复苏培养。
4.细胞复苏、培养、传代等步骤及注意事项请参考细胞说明书。
5.请严格执行无菌操作,避免污染。
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文献和实验报告基因 怎么选 EGFP 还是荧光素酶?成像和定量根本不是一回事
毒用 pspAX2 + pMD2.G 包装。 大基因(>4kb)报告基因组合建议用 GV747 大基因专用载体,5k 以内承诺滴度与出毒。 方案吃不准,可以先把要标记的基因、想要的荧光颜色和是否需要定量发给吉凯基因,让售前帮你配多报告基因载体。官网: 一句话收尾 EGFP和Luc解决的是两类问题。 参考文献与技术资料 荧光素酶报告系统优缺点对比(高灵敏、无背景、非侵入;无法空间定位、依赖底物),通用分子生物学共识。 拆分 GFP(GFP1-10 / GFP11)蛋白互补技术,标准序列见 Addgene
的双荧光素酶检测报告基因试剂盒(DLR)(真的很好使,你数据做不好是你没好好研究这个系统,没优化好质粒),还有做microRNA的系统。 对于检测仪器,绿色荧光蛋白等一个是检测静态的,观测用荧光显微镜,例如看看带有GFP标签的融合蛋白在细胞中的定位啦;另外一个是检测动态的,用荧光光度计来检测,如在FRET实验中测能量迁移,如果是多功能检测仪,这时就看仪器检测模式中有没有检测fluorescence(荧光)一项,不同的荧光蛋白激发光和发射光的频率各不相同,检测是要注意设置仪器参数,频率不同
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