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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
88
- 供应商:
澳培赛生物科技(上海)有限公司
- 组织来源:
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- 相关疾病:
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- 物种来源:
人
- 细胞形态:
见详情
- 是否是肿瘤细胞:
见详情
- 器官来源:
见详情
- 运输方式:
常温运输/干冰运输
- 生长状态:
见详情
- 规格:
T25/冻存管
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一、基本属性
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细胞名称
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MCF7细胞A4GALT基因过表达细胞株
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商品货号
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ORC0124GO0183
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种属来源
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人
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组织来源
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乳腺,乳房;源自转移部位:胸腔积液
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基因名称
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A4GALT
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基因别名
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A14GALT; A4GALT1
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基因ID
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53947
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基因物种
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人
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细胞形态
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上皮细胞样
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生长形态
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贴壁生长
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染色体号
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chr22
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蛋白ID号
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Q9NPC4
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细胞规格
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1×10^6cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
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培养条件
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气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃
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冻存条件
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无血清冻存液,液氮储存
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文献和实验大小检出(用抗报告基因或抗目的蛋白抗体); 功能验证:融合表达务必证明报告标签不影响蛋白原有功能(定位、互作、表型均正常)。 4. 冻存复检 每株至少冻存 6 支,复苏一支确认荧光维持和细胞状态后方可交付或使用。 --- 四、Luciferase 稳转株的特殊注意点 体内成像用的 Luciferase 稳转株有几个额外考量: 信号强度与细胞数线性相关:建株时应验证发光值与细胞数量的线性范围; 均一性要求高:用于动物实验的 luciferase 株建议用单克隆,避免混合克隆中低表达细胞稀释信号
1)Flp-In系统 产生背景 随着新技术的不断革新,针对真核质粒转染构建稳定表达细胞株的方法也不断地创新,出现了TALEN、IOS、Cas9和Flp-In等技术,不断地提高稳定表达细胞株构建的成功率。 Flp-In系统——以其独特的优势,广泛应用于构建过表达或静默特定基因的稳定表达细胞株,用于特定基因的功能研究。Flp-In系统依据酿酒酵母的DNA重组系统的特点,高效构建稳定哺乳动物表达细胞株。这种DNA重组系统应用重组酶(Flp)和定点重组技术,将目的基因插入到哺乳动物指定的基因组中
想长期表达某个基因,但它一高表达细胞就死、一过表达表型全是"中毒"——这时候很多老师会想到诱导表达系统: Tet 诱导稳定细胞株(Tet-On)怎么构建?和普通稳转株差在哪?诱导倍数怎么验证? 先说结论: Tet 诱导稳转株的核心是把"表达开关"装进稳转系统:细胞先稳定表达调控蛋白(Tet-On 的 rtTA),再引入由 TRE 应答元件控制的目的基因。平时不表达或低表达,加入诱导剂(多西环素 doxycycline)后才按剂量诱导表达。构建框架仍是"感染 → 筛选 → 验证 → 冻存
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