鸡蛋白激酶C（PKC）ELISA检测试剂盒

鸡蛋白激酶C（PKC）ELISA检测试剂盒

英文名称：Chicken Protein Kinase C (PKC) ELISA Kit

仅供科研检测，不可用于临床诊断

产品用途
用于检测鸡血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清等生物样本中蛋白激酶 C (PKC)活性 / 含量。

检测原理
双抗体一步夹心法 ELISA
微孔板预先包被鸡 PKC 特异性捕获抗体；加入样本、标准品、HRP 标记检测抗体共同孵育；洗去未结合组分，加入 TMB 底物显色，HRP 催化 TMB 变为蓝色，终止液酸化转为黄色；450nm 酶标仪读取 OD 值，颜色深浅与样本 PKC 浓度正相关，通过标准曲线计算样本浓度。

规格：48T、96T

试剂盒组分
30倍浓缩洗涤液              终止液
酶标试剂                         标准品
酶标包被板                       标准品稀释液
样品稀释液         说明书
显色剂A液        封板膜
显色剂B液        密封袋

保存与有效期
- 试剂盒整体：2‑8℃避光保存，禁止冷冻
- 有效期：6 个月

适用样本及处理要点
1. 血清：室温凝血 2h /4℃过夜，1000×g 离心 20min 取上清
2. 血浆：EDTA、肝素、柠檬酸钠抗凝，采集后 30 min 内 1000×g 离心 15min 分离血浆
3. 组织匀浆：组织称重加裂解液冰上匀浆，离心取上清
4. 细胞上清：1000×g 离心 10min 去除细胞碎片

简要操作流程
1. 设置空白孔、标准品孔、样本孔，每孔加样 50 μL；再加 HRP 标记抗体 100 μL，封板膜封闭
2. 37℃恒温孵育 60 min
3. 弃液洗板 5 次，拍干
4. 每孔加入底物 A、B 各 50 μL，37℃避光 15 min 显色
5. 加入终止液 50 μL，酶标仪**450 nm 测 OD 值**，拟合标准曲线计算浓度

需自备仪器耗材
酶标仪（450nm）、多通道移液器、离心管、去离子水、吸水纸、恒温孵育箱。

注意事项
1. 试剂平衡至室温（20‑25℃）再开始实验；浓缩洗涤液出现结晶，25‑37℃溶解后再稀释使用
2. 不同批次试剂盒组分不可混用
3. 终止液含酸，避免接触皮肤
4. 磷酸化 PKC（P‑PKC）为另外独立试剂盒，本试剂盒检测总 PKC，不可混淆