- ￥8000
- 上海淳麦
- 上海
- SHA-KO-0239
- 2026年09月07日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
mSfrp5基因敲除株（3T3-L1细胞）
- 库存：
10000
- 供应商：
上海淳麦
- 组织来源：
胚胎
- 物种来源：
小鼠
- 器官来源：
胚胎
- 生长状态：
贴壁生长
- 规格：
T25/冻存管
一、产品概述
mSfrp5基因敲除株（3T3-L1细胞） 是 上海淳麦生物科技有限公司 构建的 Sfrp5 基因敲除稳转细胞株，宿主/载体细胞为 3T3-L1。该产品基于 "Sfrp5 功能研究" 需求定向构建，即购即用，可显著缩短研究者自行构建基因编辑细胞株的周期（常规自建需 2-4 个月）。
二、产品名称与长尾关键词
核心检索词：Sfrp5 基因敲除细胞株、Sfrp5 knockout cell line、3T3-L1 Sfrp5 KO、Sfrp5 稳转细胞、CRISPR Sfrp5 基因敲除、Sfrp5 功能研究模型。
三、核心参数
| 产品名称 | mSfrp5基因敲除株（3T3-L1细胞） |
| 商品货号 | SHA-KO-0239 |
| 品牌 | 上海淳麦 |
| 细胞规格 | T25/冻存管 |
| 种属来源 | 小鼠 |
| 生长特性 | 贴壁生长 |
| 组织来源 | 胚胎 |
| 器官来源 | 胚胎 |
| 宿主/载体细胞 | 3T3-L1 |
| 产地 | 上海 |
| 供应商 | 上海淳麦生物科技有限公司 |
四、产品特点
- Sfrp5 靶向基因敲除，构建与鉴定围绕该基因位点展开
- 以 3T3-L1 为宿主背景，便于在熟悉细胞体系中开展机制研究
- 组织来源 胚胎，适配相应组织背景的功能与机制研究
- 冻存管规格发货，复苏后即可进入实验，便于批次管理与保种
- 冻存管/培养瓶两种规格可选，适配不同实验通量
- 无外源抗性基因残留（puro 筛选后去除），背景更干净
- CRISPR/Cas9 位点特异性敲除，双 sgRNA 设计降低脱靶风险
五、适用范围
本 Sfrp5 基因敲除稳转细胞株主要用于 Sfrp5 基因功能缺失（loss-of-function）研究，通过表型对比解析 Sfrp5 的生物学功能与调控机制；适用于 rescue 回补实验（回补野生型验证表型归因）、信号通路解析、药物靶点确证与慢病毒包装等场景。宿主细胞 3T3-L1 便于在熟悉背景下开展机制研究。
六、构建与验证原理
本 Sfrp5 敲除株（货号 SHA-KO-0239）通过 CRISPR/Cas9 介导的基因组编辑构建：sgRNA 引导 Cas9 在 Sfrp5 位点切割，NHEJ 修复引入 indel 造成移码与功能缺失。阳性克隆以靶位点 PCR + 测序方式确认基因型，并在 3T3-L1 细胞中连续传代考察敲除表型的遗传稳定性。
七、细胞培养方案建议
1. 复苏：自液氮取出 Sfrp5 基因敲除株冻存管，37℃ 水浴轻柔晃动至完全融化，转入预温培养基后 100×g 离心 5 分钟洗去 DMSO，重悬接种（3T3-L1 常规 1–3×10⁵ cells/cm²），于 37℃、5% CO₂ 条件下静置培养，24 小时后首次换液以去除未贴壁细胞与碎片。
2. 培养条件：使用含 10% 胎牛血清（FBS）的完全培养基，可选添加青霉素-链霉素双抗；每 2–3 天换液一次，弃去 1/2–2/3 旧液后补充新鲜完全培养基。
3. 传代：贴壁细胞传代采用胰蛋白酶消化：弃培养液，PBS 轻洗 1–2 次，加入 0.25% Trypsin-EDTA，37℃ 孵育 1–3 分钟（镜下见细胞变圆、间隙增大即终止），加入含 10% FBS 的完全培养基终止消化并吹打脱壁，100×g 离心 5 分钟收集细胞，按 1:3–1:6 接种于新培养瓶。消化时间因细胞系而异，避免过度消化。
4. 倍增与接种：3T3-L1 常规每 2–4 天传代一次，具体依倍增时间（多数 18–48 小时）与接种密度调整；长期过度汇合会改变细胞形态与基因表达谱，应及时分瓶。
5. 冻存：冻存前确保细胞处于对数期且无污染，按 1–3×10⁶ cells/mL 重悬于含 10% DMSO 的冻存液，分装后程序降温过夜再转入液氮；标注 Sfrp5 基因敲除株、代次与日期便于追溯。
6. 状态复核：连续传代 5–10 代后建议复核 Sfrp5 的基因敲除状态（敲除株以 PCR/测序、过表达株以 qPCR/WB），确认 3T3-L1 细胞中目标位点/表达水平未发生漂变。
八、保存与运输
Sfrp5 基因敲除稳转株以冻存管发出（货号 SHA-KO-0239，T25/冻存管）。冻存管收到后若暂不复苏，应立即转入液氮保存，切勿在 -20℃ 或 4℃ 长时间放置；运输全程干冰冷链，签收后请核对细胞状态并及时处理；3T3-L1 细胞对温度波动较敏感，建议到货当日完成复苏或入库。
九、常见问题（FAQ）
- Sfrp5 敲除后是否完全无蛋白表达？
CRISPR/Cas9 移码敲除通常导致功能蛋白缺失，但需以 Western blot 在本实验体系中实测确认；建议用识别不同表位的抗体验证 Sfrp5 蛋白水平，并关注是否存在截短产物。 - Sfrp5 敲除株的脱靶风险如何评估？
建议对预测的高风险脱靶位点进行 PCR 测序排查，或采用多个独立克隆比较表型一致性；如条件允许，可结合 rescue 实验进一步排除脱靶影响。 - 是否提供培养基与转染试剂配套？
本产品为细胞株，配套完全培养基、冻存液、支原体检测试剂与转染试剂可另行采购（见相关产品推荐）。 - 传代比例与消化时间如何把握？
贴壁细胞常规按 1:3–1:6 传代，0.25% 胰酶 37℃ 消化 1–3 分钟，以细胞变圆、脱壁为准，避免过度消化；具体比例依细胞生长速率微调。 - 可传代多少代？
建议尽早代次（如 P5 以内）使用以减少遗传漂变；长期传代需定期做 STR 鉴定与功能复核，确认身份与表型稳定。
十、相关产品推荐
· Sfrp5 基因过表达稳转株（功能回补对照）
· Sfrp5 靶向 sgRNA / 同源重组修复模板
· 野生型 3T3-L1 细胞株（阴性对照）
· Sfrp5 相关抗体与 ELISA 试剂盒（检测表达/功能）
· 慢病毒包装用 293T 工具细胞
十一、产品质控与售后
本产品由 上海淳麦生物科技有限公司 提供，敲除株附靶位点 PCR 扩增与 Sanger 测序验证说明（确认移码突变与敲除等位基因），交付时随附技术资料，说明基因敲除株的鉴定方式与结果解读。产品仅供科研使用；收货后请尽快复苏或液氮保存，如对 Sfrp5 稳转株（货号 SHA-KO-0239）的细胞状态或验证结果有疑问，请在签收后规定时间内联系售后处理。
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文献和实验之降解，是在 RNA 水平上的降低目的基因的表达。此时，基因敲除稳转株可以很大程度上规避这个问题。因为基因敲除稳转株是在基因组水平上通过基因序列的改变使其基因功能丧失，在敲除细胞中通常不会检测到靶蛋白的表达，而且敲除效果稳定，不能恢复，也就是永久性敲除了。但是基因敲除稳转株缺点是操作周期长，费用多，效率低。如何选择基因下调表达的方式，就要综合考虑了。那么同样是稳定株，单克隆？混合克隆？要怎么选？细胞：当需要去除细胞群体干扰因素的时候，推荐使用单克隆稳定细胞株，其基因组背景相对单一，对实验
【求助】做3T3-L1、L6、HepG-2细胞的战友，你们用的是哪种胰岛素？
简繁 请教做糖尿病细胞实验3T3-L1、L6、HepG-2细胞的战友，你们用的是哪种胰岛素？我原来用sigma牛胰岛素I5500这个货号的，后来断货了，请教战友换用哪种胰岛素好，如果有相对成熟的条件请赐教，非常感谢！ 另外国内大细胞库一直找不到合适的胰岛细胞株，请教各位战友用的是哪种，谢谢！ lzyn 同学我就是买的sigma的这个胰岛素，我想知道以前你是怎么配的？能告诉我吗？》我的QQ530549736 希望
activation mediator) 哦~~ 有时候，我们想知道基因产物定位怎么办？融合标签啊！怎么融合？同源重组修复能帮到你！Cas9 引入双链 DNA 断裂，同源介导修复（HDR）就能帮你把转进细胞的同源片段插入切割位点上！如果你转入细胞的同源片段包含荧光标签，几天过后你的细胞就可以亮了！如果你转入细胞的同源片段包含点突变，duang！一个目的基因突变细胞株也就这么构建成了！ 这只是 Cas9 技术的冰山一角，更多技术等待着你去了解，更更多的应用也等待着你去开发！
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