Hela细胞ARHGEF25基因过表达细胞株

一、产品概述

Hela细胞ARHGEF25基因过表达细胞株 是 上海淳麦生物科技有限公司 构建的 ARHGEF25 基因过表达稳转细胞株，宿主/载体细胞为 Hela。该产品基于 "ARHGEF25 功能研究" 需求定向构建，即购即用，可显著缩短研究者自行构建基因编辑细胞株的周期（常规自建需 2-4 个月）。

二、产品名称与长尾关键词

核心检索词：ARHGEF25 基因过表达细胞株、ARHGEF25 overexpression cell line、Hela ARHGEF25 OE、ARHGEF25 稳转细胞、CRISPR ARHGEF25 基因过表达、ARHGEF25 功能研究模型。

三、核心参数

四、产品特点

• ARHGEF25 靶向基因过表达，构建与鉴定围绕该基因位点展开
• 以 Hela 为宿主背景（人宫颈癌），便于在熟悉细胞体系中开展机制研究
• 组织来源 宫颈腺癌，适配相应组织背景的功能与机制研究
• 冻存管规格发货，复苏后即可进入实验，便于批次管理与保种
• 可与同靶点敲除株配对使用，形成功能获得/缺失对照
• 适用于基因功能、互作与信号通路研究中的过表达模型
• 稳定整合于基因组，避免瞬时转染的表达衰减问题

五、适用范围

本 ARHGEF25 基因过表达稳转细胞株主要用于 ARHGEF25 基因功能获得（gain-of-function）研究，通过稳定上调 ARHGEF25 表达解析其蛋白功能、互作网络与下游信号；适用于重组蛋白表达、病毒包装、细胞模型构建与药物敏感性评价等。宿主细胞 Hela（人宫颈癌） 适用于相应组织来源相关研究。

六、构建与验证原理

ARHGEF25 稳定过表达模型（货号 SHA-OE-0398）通过慢病毒介导的基因组整合实现：重组载体携带 ARHGEF25 编码序列与筛选标记，感染 Hela 细胞后经药筛富集阳性克隆并单克隆化。阳性株以 qPCR（mRNA 水平）与 Western blot（蛋白水平）验证 ARHGEF25 上调幅度，确保后续功能实验的表达基础可靠。

七、细胞培养方案建议

1. 复苏：自液氮取出 ARHGEF25 基因过表达株冻存管，37℃ 水浴轻柔晃动至完全融化，转入预温培养基后 100×g 离心 5 分钟洗去 DMSO，重悬接种（Hela 常规 1–3×10⁵ cells/cm²），于 37℃、5% CO₂ 条件下静置培养，24 小时后首次换液以去除未贴壁细胞与碎片。
2. 培养条件：培养基以 10% FBS 完全培养基为主，可视需要加入双抗防止污染；Hela 常规每 2–3 天换液，换液前后观察培养基颜色与 pH 变化，及时剔除异常孔/瓶。
3. 传代：贴壁细胞传代采用胰蛋白酶消化：弃培养液，PBS 轻洗 1–2 次，加入 0.25% Trypsin-EDTA，37℃ 孵育 1–3 分钟（镜下见细胞变圆、间隙增大即终止），加入含 10% FBS 的完全培养基终止消化并吹打脱壁，100×g 离心 5 分钟收集细胞，按 1:3–1:6 接种于新培养瓶。消化时间因细胞系而异，避免过度消化。
4. 倍增与接种：多数肿瘤细胞系群体倍增时间约 18–36 小时、正常细胞系约 24–48 小时（以具体细胞系特性为准）；建议汇合度达 80–90% 时传代，避免过度汇合导致分化或凋亡。
5. 冻存：冻存前确保细胞处于对数期且无污染，按 1–3×10⁶ cells/mL 重悬于含 10% DMSO 的冻存液，分装后程序降温过夜再转入液氮；标注 ARHGEF25 基因过表达株、代次与日期便于追溯。
6. 状态复核：连续传代 5–10 代后建议复核 ARHGEF25 的基因过表达状态（敲除株以 PCR/测序、过表达株以 qPCR/WB），确认 Hela 细胞中目标位点/表达水平未发生漂变。

八、保存与运输

ARHGEF25 基因过表达稳转株以冻存管发出（货号 SHA-OE-0398，T25/冻存管）。冻存管建议液氮（-196℃）长期保存，短期可于 -80℃ 暂存，4℃ 暂存不超过 48 小时；运输全程干冰冷链，签收后请核对细胞状态并及时处理；Hela 细胞对温度波动较敏感，建议到货当日完成复苏或入库。

九、常见问题（FAQ）

• 长期传代后 ARHGEF25 表达会衰减吗？
  稳转株表达盒整合于基因组，一般较稳定；但长期传代仍可能出现表达漂移，建议控制代次并定期以 qPCR/WB 复核 ARHGEF25 表达水平。
• 能否诱导表达或调控表达强度？
  本株为组成型稳定过表达株。若需诱导或梯度调控 ARHGEF25 表达，可考虑更换诱导型载体系统另行构建。
• 传代比例与消化时间如何把握？
  贴壁细胞常规按 1:3–1:6 传代，0.25% 胰酶 37℃ 消化 1–3 分钟，以细胞变圆、脱壁为准，避免过度消化；具体比例依细胞生长速率微调。
• 发货周期与运输方式？
  按平台公示的交期发货，冻存管以干冰、培养瓶以冰袋运输；具体时效受库存与目的地影响，请以下单信息为准。
• 是否有对照株？
  可提供空载体/野生型对照株或对应过表达/敲除配对株（见相关产品），便于设置实验对照。

十、相关产品推荐

· ARHGEF25 基因敲除稳转株（loss-of-function 对照）
· 空载体对照稳转株
· 野生型 Hela 细胞株（阴性对照）
· ARHGEF25 相关抗体与 ELISA 试剂盒（检测表达/功能）
· qPCR / Western blot 验证试剂

十一、产品质控与售后

本产品由 上海淳麦生物科技有限公司 提供，过表达株随货说明给出目标基因表达水平的检测方式与结果判读，交付时随附技术资料，说明基因过表达株的鉴定方式与结果解读。产品仅供科研使用；收货后请尽快复苏或液氮保存，如对 ARHGEF25 稳转株（货号 SHA-OE-0398）的细胞状态或验证结果有疑问，请在签收后规定时间内联系售后处理。