鸡肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体3（TRAIL-R3）ELIS

鸡肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体3（TRAIL-R3）ELISA检测试剂盒

英文名称：Chicken tumor necrosis factor‑related apoptosis‑inducing ligand 3（TRAIL‑R3）ELISA Kit
用途：仅供科研使用，不可用于临床诊断
检测原理：双抗体一步夹心法 ELISA。预包被 TRAIL‑R3 捕获抗体微孔板，加入样本、标准品、HRP 标记检测抗体，温育洗涤；TMB 底物显色，酸终止后酶标仪 450nm 读取 OD 值，标准曲线计算样本浓度。

基础技术参数
规格：48T / 96T
保存条件：2‑8℃，严禁冷冻
有效期：6 个月
适用样本：鸡血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清、细胞裂解液
检测范围：62.5‑2000 pg/mL
灵敏度：＜10 pg/mL
重复性：板内 CV＜10%，板间 CV＜15%
回收率：85%‑115%
特异性：识别鸡源天然及重组 TRAIL‑R3，与结构同源蛋白无明显交叉反应

试剂盒组分（96T）
30倍浓缩洗涤液              终止液
酶标试剂                         标准品
酶标包被板                       标准品稀释液
样品稀释液         说明书
显色剂A液        封板膜
显色剂B液        密封袋

自备实验器材
酶标仪（450 nm）、多规格移液枪及枪头、37℃恒温孵育箱、洗板设备、离心管、吸水纸

样本采集与保存
1. 血清：室温静置 2h 或 4℃过夜，1000×g 离心 20min，分装‑20℃/‑80℃保存，避免反复冻融。
2. 血浆：EDTA / 肝素抗凝，采集 30min 内 2‑8℃ 1000×g 离心 15min，分装冻存。
3. 组织匀浆：冰 PBS 漂洗组织，按 1g 组织 + 9mL PBS 冰上匀浆，可加蛋白酶抑制剂，离心取上清检测。

简要操作流程
1. 试剂回温至室温，浓缩洗涤液按比例稀释；
2. 设置标准品孔、样本孔，加入标准品 / 待测样本，再加 HRP 标记抗体；
3. 封板，37℃温育 60min；
4. 弃液洗板 5 次；
5. 加入底物 A、B，37℃避光显色 15min；
6. 加入终止液，450nm 读取 OD 值；
7. 根据标准曲线计算样本 TRAIL‑R3 浓度。

注意事项
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4．请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准。
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。