Adhere复合强阴离子交换介质

一.详情

Adhere复合阴离子交换介质以具有刚性结构的聚甲基丙烯酸酯微球作为基质，是一种多模式层析介质，同时具有阴离子交换、疏水和氢键作用力，专门针对单抗中度/精细纯化。它具有高流速、高载量及良好的化学稳定性和物理性能，可以缩短生产周期，提高生产效率，一步去除蛋白A、聚体、宿主蛋白、核酸和病毒。

二.特点

使用方法 

Adhere复合阴离子交换介质适用于单抗中度/精细纯化，可以去除蛋白A、聚体、宿主蛋白、核酸和病毒。其层析操作通常包括平衡、上样、淋洗、洗脱、再生等步骤。

具体的操作方法如下：

1.      平衡：用5~10CV的平衡缓冲液（如20 mM PB + 0.1 M NaCl，pH7.0，具体的缓冲体系应根据目标蛋白的稳定性和等电点进行筛选和优化）以不高于上限压力的流速平衡层析柱，至流出液电导和pH不变（与平衡液一致）。

2.      上样：样品缓冲液应尽可能与平衡液一致，固体样品可用平衡液溶解配制；低浓度样品溶液可用平衡液透析或添加相应量的盐；高浓度样品溶液可用平衡液稀释。为了避免堵塞层析柱，样品溶液应经离心或微滤（0.45μm）处理。上样量根据介质的载量和样品溶液中目标蛋白的含量计算。

3.      淋洗：上样结束后继续用平衡缓冲液淋洗，直至紫外下降至基线。

4.      洗脱：用洗脱缓冲液（如20 mM PB+1M NaCl，pH7.0）洗脱，洗脱方式可采用pH梯度洗脱、线性梯度洗脱或阶梯式梯度洗脱，收集流出液。

5.      再生：每次层析之后可用1-2M NaCl清洗层析柱，除去强结合的蛋白。

6.      原位清洗：介质使用5-10次（具体次数与原料的种类和来源及实验要求有关）后，需要对介质进行原位清洗：

1)        对于通过离子键强结合的蛋白，可用2M NaCl清洗3~4CV；

2)        对沉淀蛋白、疏水性结合的蛋白、脂蛋白，可用1M NaOH冲洗3~4CV；

3)        对强疏水性结合的蛋白、脂蛋白和脂类物质，可用70%乙醇或30%异丙醇以不高于上限压力的流速冲洗3~4CV（使用高浓度的有机溶剂时，为了避免产生气泡，应采用逐步增加有机溶剂浓度的方法）。

7.      保存：2-30℃储存于20%乙醇中；层析柱中的介质可用20%的乙醇冲洗后保存于2-30℃。

8.      其它注意事项：在使用和保存柱子的时候，要避免柱子流干或密封不严，防止气泡进入

三.规格