大鼠活化转录因子6（AFT6）ELISA检测试剂盒

大鼠活化转录因子6（AFT6）ELISA检测试剂盒

基本信息
产品名称：大鼠转录激活因子 6（ATF6）ELISA 试剂盒
英文名称：Rat ATF6 (Activating Transcription Factor 6) ELISA Kit
常用规格：48T/96T
检测方法：双抗体夹心 ELISA 法
适用样本：组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清及其他生物体液
用途：仅用于体外科研，不可临床诊断

试剂盒组分
预包被抗大鼠 ATF6 抗体酶标板（可拆卸）：1 块
冻干标准品：2 支（梯度稀释用）
浓缩生物素化抗体（100×）：120 μL
浓缩 HRP - 链霉亲和素（100×）：120 μL
TMB 显色液：10 mL
样品稀释液：20 mL
抗体稀释液：10 mL
浓缩洗涤液（20×）：50 mL
终止液：10 mL
封板膜：3 张

实验原理
抗大鼠 ATF6 抗体预包被于酶标板，形成固相抗体。
加入标准品 / 样本，ATF6 与固相抗体结合。
加入生物素化抗体，形成 “固相抗体 - 抗原 - 生物素化抗体” 复合物。
加入 HRP - 链霉亲和素，催化 TMB 显色（蓝色）。
加终止液变黄，450 nm 测 OD 值，浓度与 OD 值正相关，标准曲线定量。

操作流程（3 h 快速法）
平衡：试剂盒室温（20–25℃）放置 20 min，浓缩洗涤液稀释至 1×。
加样：
标准品孔：50 μL 梯度标准品
样本孔：10 μL 样本 + 40 μL 稀释液
空白孔：不加
孵育：每孔加 HRP 标记抗体 100 μL，封板，37℃孵育 60 min。
洗板：弃液拍干，加满洗涤液，静置 1 min，重复 5 次。
显色：每孔加 TMB A、B 液各 50 μL，37℃避光 15 min。
终止：加终止液 50 μL，30 min 内 450 nm 读数。
计算：四参数拟合标准曲线，换算样本浓度。

样本要求
1. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。
2. 不能检测含NaN3 的样品，因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。