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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
武汉恩玑生命科技有限公司
- 细胞形态:
上皮细胞样
- 运输方式:
活细胞:常温运输; 冻存管:干冰运输
- 生长状态:
贴壁生长
- 规格:
1*10^6/1*10^6
| 规格: | 1*10^6 | 产品价格: | ¥5000.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 1*10^6 | 产品价格: | ¥10000.0 |
ARHGAP36基因敲除细胞系
HEK293A细胞ARHGAP36基因敲除细胞株 定制化
细胞信息
基因信息
敲除验证数据
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文献和实验手把手教你利用 CRISPR-Cas9 系统精准敲除靶标基因
11. 基因型鉴定图 12 PPM1A 敲除基因型鉴定敲除自己感兴趣细胞的基因理论中,只要转染进 Px458M /Px459M-Guide RNA1 -Guide RNA2 载体的细胞就是基因敲出的细胞,然而我们想得到纯的基因敲除细胞株需要进行细胞单克隆化培养。对于一些细胞,单克隆化培养并不是那么容易。为了增加单个细胞的扩增,我们可以预先包被 gelatin 和条件性诱导培养液。1. 细胞提前一天铺在 6 孔板中,确保细胞密度在 70%- 80%。2. Px459M-Guide RNA
最近开始自己包装慢病毒shRNA,用的是之前组里师姐的protocol,基本上是基于TRONO LAB的protocol。之前师姐包装的病毒,效率很高,基本上能KD八成到九成。最近我自 己包装了两次,浓缩后根据之前师姐包装的病毒用量感染肝癌细胞,细胞生长速度明显 延缓,形态改变也跟之前的相似。但是做western却只能看到很marginal的蛋白水平降 低,在有的细胞株甚至完全看不到KD。我用GFP质粒转染HEK293FT,效率很高,24小时 至少看到90%的细胞有GFP表达
治疗药物载体和疫苗载体以外,在基础生物医学研究上也受到科研工作者的青睐,可以搭载最高达8kb大小的目的基因。腺病毒基因组不会整合到宿主细胞中,可以直接进行翻译和转录,相比于RNA病毒起效更快。对于细胞实验在感染后36-48小时会出现表达高峰;对于动物实验则在3-4天即达到表达高峰,表达效果可维持1-3周左右。 我们再来看一下腺病毒是如何包装生产的? 目前,腺病毒的包装系统主要有两种:AdMax系统(图1)和AdEasy系统(图2)。与慢病毒和腺相关病毒不同,腺病毒的包装细胞使用的是293A细胞
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