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- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海抚生
- 库存:
20
- 灵敏度:
1.5625ng/mL
- 样本:
血清,血浆,细胞培养上清及其他生物学样本
- 标记物:
血清/血浆
- 适应物种:
大鼠、小鼠、人、植物
- 应用:
ELISA试剂盒
- 检测方法:
ELISA法
- 检测范围:
3.125ng/mL-100ng/mL
- 规格:
48T/96T
| 规格: | 48T | 产品价格: | ¥1500.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 96T | 产品价格: | ¥2200.0 |
通过特异性抗人CASP9单克隆抗体包被于微孔板,与样本中的CASP9结合形成固相抗体复合物。加入HRP标记的检测抗体后,形成抗体-抗原-酶标抗体三明治结构。经洗涤去除未结合物质,加入TMB底物显色,HRP催化TMB转化为蓝色,酸性终止液使颜色变为黄色。颜色深浅与CASP9含量成正比,酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品浓度。
性能参数:
产品名称:人胱天蛋白酶9(CASP9)ELISA试剂盒
英文名称:Human CASP9 ELISA Kit
产品规格:48T/96T
检测样本:血清,血浆,细胞培养上清及其他生物学样本。
检测范围:3.125ng/mL-100ng/mL
灵敏度:1.5625ng/mL
特异性:与人其他细胞因子无交叉反应。
有效期:6个月(2-8℃保存)。
检测流程:
1、固相抗体包被
微孔板预先包被一种高特异性的单克隆抗体(捕获抗体),该抗体能专一识别并结合人胱天蛋白酶9(CASP9)中的特定表位。
2、样本加入与抗原结合
将待测样本(如血清、血浆或细胞培养上清)加入微孔中,样本中的CASP9会与包被抗体结合,形成“固相抗体-抗原”复合物。未结合的成分在后续洗涤步骤中被清除。
3、酶标二抗结合
加入HRP(辣根过氧化物酶)标记的第二抗体(检测抗体),该抗体识别CASP9的另一个独立表位,从而形成“捕获抗体-CASP9-检测抗体”的三明治结构。
4、显色反应
洗涤去除未结合的酶标抗体后,加入TMB底物溶液。HRP催化TMB产生蓝色产物,在酸性终止液(如硫酸)作用下变为黄色。
5、定量分析
使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),颜色深浅与样本中CASP9浓度呈正相关。
数据及参考曲线:
| 校准品浓度(ng/mL) | 100.00 | 50.00 | 25.00 | 12.50 | 6.25 | 3.13 | 1.56 | 0.00 |
| OD450/630值 | 2.740 | 1.557 | 0.817 | 0.498 | 0.289 | 0.166 | 0.092 | 0.055 |
| 校正OD值 | 2.685 | 1.502 | 0.763 | 0.443 | 0.234 | 0.111 | 0.037 | 0.000 |

关键实操技巧
1.加样技巧
一次性换新枪头,垂直贴孔壁低位加液;避免气泡、飞溅交叉污染;整板加样速度均匀统一。
2.温育控温
须37℃恒温、封板膜严实防蒸发冷凝;时间严格卡死,过长背景高、过短信号低。
3.洗板核心
每孔注满不溢出,浸泡≥30 s;拍干用无尘吸水纸,杜绝残留;洗板不足直接高背景、假阳性。
4.样本规范
杜溶血、脂浊、污染样本;禁止反复冻融;严禁含 NaN₃抑制 HRP 活性;浓度超标只用试剂盒配套稀释液。
5.显色与读数
全避光;整板显色时长一致;加终止液立刻读数,放置越久数值漂移越大。
6.基础质控
样本、标准均做复孔;室温洁净避光操作;试剂分装取用,减少反复开盖失效。
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文献和实验针对同一指标,生化试剂盒和 ELISA 试剂盒的检测结果趋势是一致的吗?
),或者转化1 μmol的有关基团的酶量。 2) ELISA试剂盒检测原理 ELISA是以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体──聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行,每加入一种试剂孵育后,可通过洗涤除去多余的游离反应物,从而保证试验结果的特异性与稳定性。在实际应用中,通过不同的设计,具体的方法步骤可有多种。即:用于检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法(图A)、用于检测抗原的双抗体夹心法(图B)等等。 抗体
液中,有制成易保存的浓缩液,使用时用蒸馏水稀释。先进的ELISA试剂盒中则直接配成含保护剂的工作浓度为0.02% H2O2的应用液,只需加入OPD后即可作为底物应用液。 TMB经HRP作用后共产物显蓝色,目视对比鲜明。TMB性质较稳定,可配成溶液试剂,只需与H2O2溶液混和即成应用液,可直接作底物使用。另外,TMB又有无致癌性等优点,因此在ELISA中应用日趋广泛。酶反应用HCL或H2SO4终止后,TMB产物由蓝色呈黄色,可在比色计中定量,最适吸收波长为405nm。 ABTS虽不如OPD
小鼠凝血酶敏感蛋白-1(TSP-1)ELISA试剂盒 说明书
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