大肠杆菌通用型（EC-U）核酸检测试剂盒(荧光PCR法)

大肠杆菌通用型（EC-U）核酸检测试剂盒(荧光PCR法)

产品基本信息
产品名称：大肠杆菌通用型（EC-U）核酸检测试剂盒(荧光PCR法)
英文名称：Escherichia coli Universal (EC-U) PCR Fluorescent Probe Kit
包装规格：50T / 盒
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融；有效期 12 个月

预期用途
用于定性检测样本中大肠杆菌（E. coli）通用型核酸，适用于大肠杆菌感染的辅助诊断、食品安全筛查及流行病学监测。

检验原理
采用TaqMan 探针法实时荧光 PCR 技术。针对大肠杆菌保守基因（如 16S rRNA、uidA 或 lacY）设计特异性引物与 FAM 标记荧光探针。PCR 扩增时，荧光信号随产物积累同步增强，仪器实时监测荧光变化，实现对大肠杆菌核酸的快速定性检测。

试剂盒组成
组分    规格    主要成分
EC-U 反应液    500μL×2 管    dNTPs、Mg²⁺、缓冲液、稳定剂
酶液    50μL×1 管    热启动 Taq DNA 聚合酶
阳性质控品    50μL×1 管    大肠杆菌标准 DNA
阴性质控品    250μL×1 管    无菌去离子水

适用仪器
适配主流实时荧光定量 PCR 仪：
ABI 7500/7900
Bio-Rad CFX96
Roche LightCycler 480
宏石 SLAN-96S/96P

操作流程（25μL 体系）
样本处理与 DNA 提取
液体样本：1mL 离心（12,000rpm，3min），沉淀加 50μL 提取液，沸水浴 10min，离心取上清。
拭子 / 组织：按对应方法提取核酸。
反应体系配制（冰上操作）
EC-U 反应液：20μL
酶液：1μL
模板 DNA（样本 / 阳控 / 阴控）：4μL
总体积：25μL
PCR 扩增程序
预变性：95℃，5min
循环（40 次）：95℃ 30s → 50℃ 30s → 72℃ 40s
终延伸：72℃，5min
荧光采集：FAM 通道

结果判读（FAM 通道）
阳性：S 型扩增曲线，Ct≤35
阴性：无扩增曲线或Ct>38
可疑：35＜Ct≤38，建议复检

质量控制要求
每批次实验必须同时设置阳性对照与阴性对照。
阳性对照 Ct 值应在25–32之间；阴性对照无扩增。
若对照结果异常，整批实验无效，需重新检测。
本产品仅供科研。