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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海抚生
- 库存:
20
- 灵敏度:
0.39ng/mL
- 样本:
血清,血浆,细胞培养上清及其他生物学样本
- 标记物:
血清/血浆
- 适应物种:
大鼠、小鼠、人、植物
- 应用:
ELISA试剂盒
- 检测方法:
ELISA法
- 检测范围:
0.78ng/mL-50ng/mL
- 规格:
48T/96T
| 规格: | 48T | 产品价格: | ¥1500.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 96T | 产品价格: | ¥2200.0 |
通过特异性抗人NTCP单克隆抗体包被于微孔板,与样本中的NTCP结合形成固相抗体复合物。加入HRP标记的检测抗体后,形成抗体-抗原-酶标抗体三明治结构。经洗涤去除未结合物质,加入TMB底物显色,HRP催化TMB转化为蓝色,酸性终止液使颜色变为黄色。颜色深浅与NTCP含量成正比,酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品浓度。
性能参数:
产品名称:人Na+牛磺胆共转运多肽(NTCP)ELISA试剂盒
英文名称:Human NTCP ELISA Kit
产品规格:48T/96T
检测样本:血清,血浆,细胞培养上清及其他生物学样本。
检测范围:0.78ng/mL-50ng/mL
灵敏度:0.39ng/mL
特异性:与人其他细胞因子无交叉反应。
有效期:6个月(2-8℃保存)。
检测流程:
1、固相抗体包被
微孔板预先包被一种高特异性的单克隆抗体(捕获抗体),该抗体能专一识别并结合人Na+牛磺胆共转运多肽(NTCP)中的特定表位。
2、样本加入与抗原结合
将待测样本(如血清、血浆或细胞培养上清)加入微孔中,样本中的NTCP会与包被抗体结合,形成“固相抗体-抗原”复合物。未结合的成分在后续洗涤步骤中被清除。
3、酶标二抗结合
加入HRP(辣根过氧化物酶)标记的第二抗体(检测抗体),该抗体识别NTCP的另一个独立表位,从而形成“捕获抗体-NTCP-检测抗体”的三明治结构。
4、显色反应
洗涤去除未结合的酶标抗体后,加入TMB底物溶液。HRP催化TMB产生蓝色产物,在酸性终止液(如硫酸)作用下变为黄色。
5、定量分析
使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),颜色深浅与样本中NTCP浓度呈正相关。
数据及参考曲线:
| 校准品浓度(ng/mL) | 50.00 | 25.00 | 12.50 | 6.25 | 3.13 | 1.56 | 0.78 | 0.00 |
| OD450/630值 | 2.691 | 1.620 | 0.834 | 0.493 | 0.320 | 0.165 | 0.099 | 0.031 |
| 校正OD值 | 2.661 | 1.590 | 0.803 | 0.463 | 0.289 | 0.135 | 0.068 | 0.000 |

一、样本处理:
血清/血浆:避免溶血,2-8℃保存48小时;长期保存需分装冻存(-20℃或-70℃),避免反复冻融。
细胞培养上清:离心去除细胞碎片,取上清液。
组织匀浆:使用生理盐水匀浆,离心取上清。
二、加样:
标准品孔:加入50μL不同浓度标准品(如80、40、20、10、5、2.5 U/L)。
样本孔:加入50μL待测样本(血清/血浆需1:2稀释)。
空白孔:不加任何液体。
三、温育与洗涤:
封板后37℃温育60分钟。
弃去液体,吸水纸拍干,加满洗涤液(350μL),静置1分钟,甩干,重复洗板5次。
四、显色与终止:
每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15分钟。
加入50μL终止液,混匀后颜色由蓝变黄。
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文献和实验因素。但致病机理尚未完全阐明:下列两种学说值得进一步研究加以证实:①Marshall提出,Hp―胃炎―溃疡的感染学说:初步感染Hp经过1周左右的潜伏期,约50%的人发生急性胃炎,如机体的免疫力不能清除Hp,则逐渐发展成癌;由于胃粘膜屏障破坏,易于遭受酸和胃蛋白酶的消化形成溃疡;②氨素毒性学说:Hp产生的大量尿素酶快速水解尿素生成氨,导致胃粘膜上皮细胞周围环境改变,形成跨膜氨梯度,并使Na+-K+-ATP酶活性降低,从而阻止H+由粘膜向胃腔内主动转运,促进胃腔H+逆向扩散形成炎症,进而粘膜发生
的 O-连聚糖的糖蛋白 [14,15 ] 。这些细胞核蛋白是否为 SPIN-DLY 和 SEC 的底物仍是个谜。 1.3 糖基化的异质性 真核细胞的成熟分泌糖蛋白 N-糖基化模式是内质网中的寡聚糖共翻译转运过程和其在内质网和高尔基体内加工的共同结果。多肽折叠因子会影响内质网内潜在糖基化位点 [16] 。结果导致蛋白质中的多个 N-糖基化位点中有些位点为无效糖基化位点,其他一些则未能完全糖基化 [17~19] 。 同时,多糖侧链的修饰加工与其是否接触到成熟的酶相关。虽然被包被在蛋白
的亲和力,并必须在浓度约10-8M(≥1μg/ml)时在血清中有效,使之对大鼠感染对照模型有保护作用。 可进行一个历时4~5小时的体内试验,检测CTLs对感染的靶细胞或转运浓度约10-9~10-10M的T细胞相关抗原的靶细胞的溶细胞活性,CTLs的保护能力与之有关。 下面的体内试验结果可能高估了B,T细胞的活性和其预存的功能细胞数量:测得ELISA标记抗体的亲和力<107M-1,T细胞溶解的靶细胞可转运浓度约10-6~10-7M的抗原肽。
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