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500ml
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产品简介:
产品简介 悬浮培养基主要用于λ噬菌体原种的保存和稀释,是分子生物学常规试剂。悬浮培养基(SM,2%)主要由氯化钠、硫酸镁、Tris-HCl、明胶等组成。经15psi高压灭菌20min。 产品用途 λ噬菌体原种的保存和稀释。 储存条件 4℃,有效期12个月。
备注1:
备注2:SM buffer:
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文献和实验cDNA AMPLIFICATION FROM LAMBDA-PHAGE LIBRARY
PREPARE SOLUTIONS 1. SM buffer (1 L): Mix 5.8 g of NaCl, 2 g of MgSO4 -7H2 O, 50 mL of 1M Tris-HCl, pH 7.5, 0.5 mL of 2% gelatin, and dH2 O to 1 L (Autoclave) 2. TENS
-NBT 显色液中避光显色,水平摇动直到阳性斑点可见为止。 17. 从显色液中取出膜放在 TBS溶液中,空气中使膜干燥。 18. 根据所做的标记,将膜与平板对齐,将平板上对应的阳性克隆区域的培养基挖出放入 500μl SM buffer中,并加入 25 ml chloroform,4℃贮存 (最多可贮6月)。 19. 第一轮筛选得到阳性克隆需要进行第二轮筛选以去除假阳性并获得阳性单克隆噬菌体。过程如第一轮筛选,只不过用直径90mm 平板;具体过程见步骤 4, 这时所加入的噬菌体溶液是第一
,洗膜3 次,每次10 分钟,最后用50ml TBS溶液洗膜15-20 分钟,取出膜空气中沥干。 16. 将膜放入BCIP-NBT 显色液中避光显色,水平摇动直到阳性斑点可见为止。 17. 从显色液中取出膜放在TBS 溶液中,空气中使膜干燥。 18. 根据所做的标记,将膜与平板对齐,将平板上对应的阳性克隆区域的培养基挖出放入500μl SM buffer 中,并加入25 ml chloroform,4℃贮存(最多可贮6 月)。
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