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产品简介:
产品说明 Red Loading Buffer Pack 在蛋白质印迹实验中用于裂解细胞。 产品包括 3X Red Loading Buffer 8ml 30X Reducing Agent (1.25 M DTT) 1ml 溶液和试剂 数量: 8 ml 3X Red Loading Buffer 和1 ml 30X Reducing Agent。 3X Red Loading Buffer Pack:187.5 mM Tris-HCl (pH 6.8 at 25ºC)、6% (w/v) SDS、30% 甘油和 0.03% (w/v) 酚红。(保存在室温下。) 30X Reducing Agent:1.25 M 二硫苏糖醇 (DTT)(保存在 -20ºC 下。) 产品使用信息 1. 添加 1/10 体积的 30X DTT Reducing Agent 到 1 体积的 3X SDS Loading Buffer 中,以配制新鲜的 3X Reducing SDS Loading Buffer。 2. 用 ddH2O 将 3X SDS Loading Buffer 稀释为 1X 溶液。该产品提供的 3X 物质足以配制 24ml 1X 溶液。 3. 从培养物中吸出培养基;用 1X PBS 洗涤细胞;吸出。 4. 加入 1X SDS 上样缓冲液(6 孔板每孔 100 µl 或 10 cm² 平板每平板 500 µl)来裂解细胞。立即从板上刮下细胞并将提取物转移至微量离心管。置于冰上。 5. 超声处理 10-15 秒来剪切 DNA 并降低样品粘度。 6. 将 20 µl 样品加热到 95-100°C,持续 5 分钟;放在冰上冷却。 7. 微量离心分离 2-5 分钟。 8. 上样 20 µl 到 SDS-PAGE 凝胶 (10 cm x 10 cm) 上。 产品保存 3X Red Loading Buffer Pack:187.5 mM Tris-HCl(在 25ºC 下 pH 为 6.8)、6% (w/v) SDS、30% 甘油和 0.03% (w/v) 酚红。(保存在室温下。) 30X Reducing Agent:1.25 M 二硫苏糖醇 (DTT)(保存在 -20°C 下。) 产品仅供科学研究 禁止用于临床诊断、治疗。
备注1:
备注2:Red Loading Buffer Pack:
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文献和实验ChIP Protocol-Mechanical Breakage & FA Lysis Buffer
ChIP Protocol-Mechanical Breakage & FA Lysis Buffer Day -2: o Start a 5ml overnight culture from a single colony. Day -1: o Start a larger overnight culture using part of the 5ml culture (subculture). Day
的 Blue Loading buffer Pack #7722 或 Red Loading buffer Pack #7723 或 Cell Lysis Buffer (10X) #9803 或 RIPA Buffer (10X) #9806)后、上样前对所有的样本进行超声处理。超声条件:在 35%~40% 的功率输出条件下破碎 3 次,每次 10 秒,各次之间间隔 10 秒,冰上操作。但不同的超声仪器有不同的性能,应根据生产商的建议进行个性化优化。如果您没有探头超声仪,也可用细的注射器针头反复吹打
做了两个月的时间的 western blotting 终于出了比较好的结果。 老板让整理出protocol 这是写的PROTOCOL 大概会有很多错误请大家指正!谢谢先 WESTERN PROTOCOL A. Preparation of Samples 1. Get the heads of the fly 2. Stir them in the lysis buffer(4heads/10ul) 3. Add 2XSDS-gel-loading buffer
技术资料暂无技术资料 索取技术资料










