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- 文献和实验
- 技术资料
- CAS号:
/
- 规格:
25mg/50mg/100mg
| 规格: | 25mg | 产品价格: | ¥215.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 50mg | 产品价格: | ¥328.0 |
| 规格: | 100mg | 产品价格: | ¥511.0 |
Product Introduction
Bioactivity
| 名称 | Collagenase Type II |
| 描述 | Collagenase Type II, an endopeptidic matrix metalloproteinase MMP-8 derived from the bacterium Clostridium histolyticum, preferentially degrades type I collagen and is commonly used in tissues requiring high digestive efficiency such as pancreas and liver. |
| 体外活性 | Collagenase Type II通常用于从心脏、骨骼、肝脏、胸腺、唾液腺和软骨中制备原代细胞[1]。 使用说明 (1)溶解:将II型胶原酶在Hank's平衡盐溶液(HBSS)中溶解至1mg/mL的浓度,然后使用0.2μm滤器进行无菌过滤。常用浓度为0.5-2.5mg/mL(用于组织和细胞分散),1-2mg/mL(用于软骨消化),具体浓度可根据实验条件或文献建议进行调整。 (2)处理组织或细胞层:将小块组织或细胞层用胶原酶溶液覆盖,并在37°C下孵育。将组织切成3-4mm大小的块,用含Ca²⁺、Mg²⁺的HBSS溶液洗涤。将胶原酶溶液添加至组织块,确保其完全浸没,保持37°C孵育4-18小时(时间依据组织类型而有所不同)。可以使用水平摇床,并可添加3mM的CaCl₂以提高消化效率。 (3)检查细胞分离情况:使用显微镜观察细胞是否成功分离。 (4)离心和洗涤:细胞分离后应立即进行离心,并使用缓冲液洗涤两次,以去除残留的胶原酶,因为新鲜培养基无法停止酶的活性。 (5)重悬和培养:将细胞重悬于新鲜培养基中,并继续培养。 |
| 体内活性 | 以白兔为实验对象,在膝关节实验中,右膝注射Collagenase Type II(4 mg/mL,250 μL),并于3天后重复注射,左膝则注射生理盐水作为对照。结果显示,右膝出现水肿和厚度增加,8天后软骨表面粗糙且退化加重,I型和II型胶原蛋白表达异常。血液中仅在第8和16天时观察到中性粒细胞短暂增加,无系统性炎症反应,表明该方法仅引起局部软骨退化。该诱导的骨关节炎模型能够模拟人类骨关节炎(OA)的病理过程,且不会引发类风湿性关节炎的系统性炎症[2]。在角膜实验中,右眼(实验组)用Collagenase Type II(200 μL,5 mg/mL)处理30分钟,左眼(对照组)则用不含胶原酶的溶液进行处理。结果显示,术后实验组未出现明显炎症反应,与对照组相比,实验组的平均角膜曲率显著增加,中央角膜厚度显著降低。特定畸形下,实验组的平均应力和弹性模量也显著降低,表明Collagenase Type II可以有效模拟圆锥角膜[3]。 |
| 存储条件 | Keep away from moisture,Store at low temperature Powder: -20°C for 3 years | In solvent: -80°C for 1 year Shipping with blue ice/Shipping at ambient temperature. |
| 溶解度 | H2O : 50 mg/mL, Sonication is recommended. |
| 关键字 | CollagenaseTypeII |
| 相关产品 | Rhamnose monohydrate | Doxycycline (hyclate) | Astragaloside IV | Anethole | Meloxicam | Doxycycline | Glucosamine | Chloramphenicol | Methylchloroisothiazolinone/Methylisothiazolinone Mixture | Chondroitin sulfate | Propoxur | Edaravone |
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文献和实验丁香园网友yuanjianmei的问题为:胶原酶2一定要用D-hank's液配制吗?消化血管细胞一次要用多少啊?丁香园网友张艳红的观点为:用D-hank's液配制也可,但不一定。我做的是软骨细胞的原代培养,用的是1640完全培养基配制的。你消化血管细胞如果是做原代培养,我估计用6-8ml就可。我用时每次用8-10ml。当然,这也得视取用的组织特性和组织的量而定。仅供参考。丁香园网友wwj_5265994的观点为:不一定,我用PBS配的,我做的也是软骨细胞原代培养,用PBS配的,消化效果很好
气坏疽菌——韦氏梭菌在培养滤液中产生的一种毒蛋白。它具有蛋白酶的作用,可分解胶原蛋白和白明胶等,但不能分解卵清蛋白和血清蛋白。能对脯氨酸-X-甘氨酸 -脯氨酸 -Y这样结构的甘氨酸和脯氨酸间的结合键水解。 EC3. 4. 24. 3.
问:有人提到一种酶缓冲液提供酶反应条件,酶蛋白即催化底物明胶,不知道是怎么回事情。我要测定活性和分泌。我知道是要使用聚丙烯酰胺凝胶电泳的,请教具体的实验方法很所需要的试剂。谢谢! 答:Type IV collagenase, 72-kD, is officially designated matrix metalloproteinase-2 (MMP2). It is also known as gelatinase, 72-kD. Type IV collagenase
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