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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海抚生
- 库存:
20
- 灵敏度:
0.125ng/mL
- 样本:
血清,血浆,细胞培养上清及其他生物学样本
- 标记物:
血清/血浆
- 适应物种:
大鼠、小鼠、人、植物
- 应用:
ELISA试剂盒
- 检测方法:
ELISA法
- 检测范围:
0.25ng/mL-16ng/mL
- 规格:
48T/96T
| 规格: | 48T | 产品价格: | ¥1500.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 96T | 产品价格: | ¥2200.0 |
| 产品名称 | 小鼠7-乙氧基-3-异吩恶唑酮-脱乙基酶(EROD)ELISA试剂盒 | 英文名称 | Mouse EROD ELISA Kit |
| 灵敏度 | 0.125ng/mL | 检测范围 | 0.25ng/mL-16ng/mL |
| 产品货号 | A116250 | 用途 | 仅供科研研究实验 |

通过特异性抗小鼠EROD单克隆抗体包被于微孔板,与样本中的EROD结合形成固相抗体复合物。加入HRP(辣根过氧化物酶)标记的检测抗体后,形成“捕获抗体-ERODA-检测抗体”的三明治结构。经洗涤去除未结合物质,加入TMB底物显色,HRP催化TMB产生蓝色产物,在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品浓度。
数据及参考曲线:

| 校准品浓度(ng/ml) | 16.00 | 8.00 | 4.00 | 2.00 | 1.00 | 0.50 | 0.25 | 0.00 |
| OD450/630值 | 2.732 | 1.610 | 0.831 | 0.489 | 0.351 | 0.161 | 0.091 | 0.051 |
| 校正OD值 | 2.681 | 1.559 | 0.780 | 0.438 | 0.300 | 0.110 | 0.040 | 0.000 |


该方法采用双抗体夹心ELISA技术:
微孔板预先包被特异性抗小鼠EROD单克隆抗体(捕获抗体);
加入待测样本后,样本中的EROD与固相抗体结合;
随后加入生物素化或HRP标记的检测抗体,形成“捕获抗体-ERODA–检测抗体”复合物;
洗涤后加入HRP标记的亲和素(若使用生物素-亲和素系统),再加入TMB底物显色;
HRP催化TMB生成蓝色产物,酸性终止液使其变为黄色;
在450nm波长下测定吸光度(OD值),颜色深浅与EROD胰淀素浓度呈正比,通过标准曲线计算浓度。
公司正在出售的产品:
| 小鼠肌腱干细胞 | 大鼠磷脂酰肌醇抗体IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM)ELISA试剂盒 |
| 小鼠肺血管平滑肌细胞 | 大鼠蛋白磷酸脂酶(PP2A)elisa试剂盒 |
| 人软骨细胞 | 人抗巨噬细胞抗体(anti-macrophage Ab)ELISA试剂盒 |
| 大鼠脾脏单核细胞 | 人野鼠色基因相关蛋白(AGRP)ELISA试剂盒 |
| 小鼠肌源性干细胞 | 大鼠硫氧化还原蛋白(Trx)ELISA试剂盒 |
| 小鼠腹膜毛细血管内皮细胞 | 大鼠骨膜蛋白(POSTN)elisa试剂盒 |
| 人肾成纤维细胞 | 人抗类固醇生成细胞抗体(SCA)ELISA试剂盒 |
| 兔肾动脉内皮细胞 | 人糖抗原50(CA50)ELISA试剂盒 |
| 大鼠骨髓造血干细胞 | 大鼠苗条素受体(LR/Ob-R)ELISA试剂盒 |
| 小鼠脊髓微血管内皮细胞 | 大鼠磷酸化核因子E2相关因子2(P-Nrf2)elisa试剂盒 |
| 小鼠肝动脉内皮细胞 | 人抗磷脂抗体(Apl/APA)ELISA试剂盒小鼠7-乙氧基-3-异吩恶唑酮-脱乙基酶(EROD)ELISA试剂盒 |
| 人肾足突细胞 | 大鼠蛋白质亚硝基化(PN)elisa试剂盒 |
| 鸡滑膜细胞 | 大鼠内分泌腺来源的血管内皮生长因子(EG-VEGF)ELISA试剂盒 |
| 人肾动脉内皮细胞 | 大鼠阿黑皮素原(POMC)elisa试剂盒 |

一. 试剂准备
将试剂盒所有组分平衡至室温(20–25℃,≥30min);浓缩洗涤液按 1:19 稀释配制工作液。
标准品用标准品稀释液复溶,梯度稀释,配置系列浓度梯度标准溶液,备用。
二. 实验流程
加样:设置空白孔、标准孔、样本孔,每孔加入 100 μL 对应标准品 / 待测样本,封板,37℃恒温孵育 90 min。
洗涤:弃净孔内液体,每孔加满洗涤工作液,静置 30 s,甩干拍净,重复洗涤 5 次。
加酶结合物:每孔加入 100 μL HRP 标记检测抗体,封板混匀,37℃孵育 60 min。
洗涤:重复上述洗涤步骤 5 次,彻底拍干微孔。
显色:每孔避光加入 90 μL TMB 底物显色液,轻柔混匀,37℃避光显色 15 min。
终止:按同等顺序每孔快速加入 50 μL 终止液,轻晃混匀,溶液由蓝转黄。
读数:15 min 内,酶标仪 450 nm 波长测定各孔 OD 值,拟合标准曲线计算样本含量。
三. 关键质控要点
全程孵育使用专用封板膜,防止液体蒸发、交叉污染。
洗涤充分为实验核心,残留洗液易造成背景偏高、假阳性。
TMB 显色液避光储存,现用现加,严禁接触氧化剂。
加终止液顺序需与显色加样一致,避免局部色差、绿色残留。
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文献和实验,最常用的供氢体是DAB。 DAB (二氨基联苯胺) • DAB本身无色,反应后呈棕色,不溶于水,不易褪色,电子密度高,最为常用。 • 目前已经有商品化的试剂盒,使用起来非常方便。 (2) 碱性磷酸酶(AP)及底物 • AP为磷酸酯的水解酶,可通过两种反应显色: – 偶氮偶联反应,底物为-萘酚磷酸盐,经水解后得-萘酚,与重氮化合物如坚牢蓝(fast blue)或坚牢红(fast red)形成不溶性沉淀,分别呈兰色或红色。 – 靛蓝-四唑反应:底物为溴氯羟吲哚磷酸
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过氧化物酶可以将H2O2为底物,将3-氨基-9-乙基咔唑氧化成褐色产物或将4-氯萘酚氧化成蓝色产物。另一种检测辣根过氧化物酶的方法是用增强化学发光法,辣根过氧化物酶在H2O2存在下,氧化化学发光物质鲁米诺并发光,通过将印迹放在照相底片上感光就可以检测出辣根过氧化物酶的存在,即目标蛋白质的存在了。除了酶连二抗作为指示剂,也可以使用其它指示剂,比如:荧光素异硫氰酸盐标记的二抗(可通过紫外灯产生荧光);生物素结合的二抗等等。 除了使用抗体或蛋白作为检测特定蛋白的探针以外,有时也使用其它探针如放射性标记的DNA
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