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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海抚生
- 库存:
20
- 灵敏度:
0.078ng/mL
- 样本:
血清,血浆,细胞培养上清及其他生物学样本
- 标记物:
血清/血浆
- 适应物种:
大鼠、小鼠、人、植物
- 应用:
ELISA试剂盒
- 检测方法:
ELISA法
- 检测范围:
0.156ng/mL-10ng/mL
- 规格:
48T/96T
| 规格: | 48T | 产品价格: | ¥1500.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 96T | 产品价格: | ¥2200.0 |
通过特异性抗人RASGRP2单克隆抗体包被于微孔板,与样本中的RASGRP2结合形成固相抗体复合物。加入HRP标记的检测抗体后,形成抗体-抗原-酶标抗体三明治结构。经洗涤去除未结合物质,加入TMB底物显色,HRP催化TMB转化为蓝色,酸性终止液使颜色变为黄色。颜色深浅与RASGRP2含量成正比,酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品浓度。
性能参数:
产品名称:人Ras脒基释放蛋白2(RASGRP2)ELISA试剂盒
英文名称:Human RASGRP2 ELISA Kit
产品规格:48T/96T
检测样本:血清,血浆,细胞培养上清及其他生物学样本。
检测范围:0.156ng/mL-10ng/mL
灵敏度:0.078ng/mL
特异性:与人其他细胞因子无交叉反应。
有效期:6个月(2-8℃保存)。
检测流程:
1、固相抗体包被
微孔板预先包被一种高特异性的单克隆抗体(捕获抗体),该抗体能专一识别并结合人Ras脒基释放蛋白2(RASGRP2)中的特定表位。
2、样本加入与抗原结合
将待测样本(如血清、血浆或细胞培养上清)加入微孔中,样本中的RASGRP2会与包被抗体结合,形成“固相抗体-抗原”复合物。未结合的成分在后续洗涤步骤中被清除。
3、酶标二抗结合
加入HRP(辣根过氧化物酶)标记的第二抗体(检测抗体),该抗体识别RASGRP2的另一个独立表位,从而形成“捕获抗体-RASGRP2-检测抗体”的三明治结构。
4、显色反应
洗涤去除未结合的酶标抗体后,加入TMB底物溶液。HRP催化TMB产生蓝色产物,在酸性终止液(如硫酸)作用下变为黄色。
5、定量分析
使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),颜色深浅与样本中RASGRP2浓度呈正相关。
数据及参考曲线:
| 校准品浓度(ng/ml) | 10.00 | 5.00 | 2.50 | 1.25 | 0.63 | 0.31 | 0.16 | 0.00 |
| OD450/630值 | 2.680 | 1.540 | 0.838 | 0.493 | 0.368 | 0.155 | 0.093 | 0.025 |
| 校正OD值 | 2.655 | 1.515 | 0.813 | 0.468 | 0.343 | 0.130 | 0.068 | 0.000 |

一、试剂准备
所有试剂使用前平衡至室温(18–25℃);
洗涤液按比例稀释(如10×稀释为1×);
标准品用稀释液复溶并进行倍比稀释(如0、0.5、1、2、4、8 ng/mL)。
二、加样
设立标准孔、样本孔和空白孔(仅加稀释液);
每孔加入50 μL标准品或待测样本;
可对血清/血浆样本进行1:2预稀释以减少基质干扰。
三、温育
封板后37℃温育60分钟,使抗原充分结合;
温育期间避免阳光直射。
四、洗涤
弃去孔内液体,每孔注入300–350 μL洗涤液;
静置30秒至1分钟,甩干,重复5次;
拍干微孔板,避免残留液滴影响后续反应。
五、加酶标抗体
每孔加入100 μL生物素化检测抗体;
37℃避光温育60分钟。
六、再次洗涤
同上法洗涤5次,确保彻底清除未结合抗体。
七、加HRP-亲和素
每孔加入100 μL HRP标记亲和素;
37℃避光温育30–60分钟。
八、第三次洗涤
再次洗涤5次,拍干。
九、显色
每孔加入显色剂A和B各50 μL(或TMB单组分90–100 μL);
37℃避光显色15–30分钟,观察颜色变化。
十、终止反应
每孔加入50 μL终止液,轻轻震荡混匀;
溶液颜色由蓝变黄,立即进行测定。
十一、读数与分析
使用酶标仪在450 nm波长下测定OD值;
以标准品浓度为横坐标,OD值为纵坐标,绘制标准曲线;
将样本OD值代入方程,计算TPS浓度。
公司正在出售的产品:
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文献和实验3 NS5是血转化最早测得的抗体,提高了诊断的准确性。 * NS4 为俩个片断的合成多肽,去掉了非特异性反应的区域,加强了试剂的灵敏度和特异性。 2.1.4 第四代HCV—ELISA 试剂盒 -美国新近推出一种包括HCV基因组7个功能区所有免疫决定基的单一融合蛋白,称为多决定基融合抗原,采用表面活性剂处理分界病毒表面复合物,释放HCV核心抗原(core)并用ELISA法,灵敏度可达500拷贝/ml,已接近核酸扩增检测水平。 -抗原组合:以Core和NS3作为主要检测片断
或抗原成份。有些标本可直接进行测定(如血清、尿液),有些则需经预处理(如粪便和某些分泌物)。 大部分ELISA 检测以血清标本为主。血浆中除尚含有纤维蛋白原和抗凝剂外,其他成份均同等于血清。制备血浆标本需借助于抗凝剂,而血清标本只要待血清自然凝固、血块收缩后即可取得。血清标本可按常规方法采集,应注意避免溶血,红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质,以 HRP 为标记的 ELISA 测定中,溶血标本可能会增加非特异性显色。 血清标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染,菌体中可能含有内源性 HRP,也会
酶的ELISA试剂盒中使用的洗板液一般为含0.05% Tween20的中性PBS,Tween20为一种非离子去垢剂,既含亲水基团,也含疏水基团,其在洗涤中的作用机理是,借助其疏水基团与经疏水性相互作 用被动吸附于聚苯乙烯固相上蛋白的疏水基团形成疏水键,从而削弱蛋白与固相的吸附,同时在其亲水基团与液相中水分子的结合作用下,促使蛋白质脱离固相而进 入液相,这样就可达到去掉非特异吸附物的目的,但由于抗体或抗原的包被通常也是通过在碱性条件下与固相的疏水性相互作用而被动吸附于固相,因此要注意非离 子去垢剂的使用
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