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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 细胞类型:
原代细胞
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 库存:
15
- 英文名:
Rat Spinal Cord Neurons Cells
- 生长状态:
贴壁培养
- 运输方式:
视天气状况和运输距离远近
- 细胞形态:
不规则细胞
- 物种来源:
大鼠,其他咨询
- 组织来源:
实验动物的正常脊髓组织
- 规格:
5*10^5
大鼠原代脊髓神经元细胞
脊髓是中枢神经的一部分,位于脊椎骨组成的椎管内,呈长圆柱状。
神经元是构成神经系统结构和功能的基本单位。神经元具有长突起,由细胞体和细胞突起构成。
基础信息
产品名称:大鼠原代脊髓神经元细胞
货号:XY-yd0787(烜雅生物)
种属:大鼠
组织来源:实验动物的正常脊髓组织
规格:5×10⁵ cells/T25 培养瓶;或 > 1×10⁶ cells / 冻存管
细胞特性
形态:贴壁生长;胞体饱满、折光性强、呈锥形 / 多边形;培养 2–3 天伸出细长突起,6–7 天形成神经网络分化状态:终末分化细胞,无增殖能力,不可传代,建议直接用于实验
纯度:≥90%(NSE/β-Tubulin III 免疫荧光鉴定阳性)
无菌检测:无 HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、真菌污染
培养周期:体外存活约 20 天,7–14 天活性最佳
培养体系(专用)
基础培养基:Neurobasal/B-27 Supplement,含谷氨酰胺、双抗
包被:0.1 mg/mL 多聚 - L - 赖氨酸(PLL)预包被培养器皿
环境:37℃、5% CO₂、饱和湿度
换液:每 2–3 天半量换液,避免扰动细胞网络
运输与保存
活细胞运输:T25 培养瓶满液常温运输,收到后 2 h 内换液培养
冻存运输:干冰运输;液氮保存,复苏后直接使用
质量控制
形态学:显微镜下观察神经元形态、突起生长及网络形成
免疫荧光:NSE、β-Tubulin III 阳性率≥90%
微生物检测:支原体、细菌、真菌阴性
活性:台盼蓝染色活率≥85%
注意事项
不可扩增 / 传代,避免胰酶过度消化损伤突起
接种密度建议:5×10⁴ cells/cm²,密度过低难以形成网络
避免频繁换液与搬动,防止突触断裂
仅限科研用途,不可用于临床
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文献和实验大鼠原代脊髓神经元细胞
+20%FBS)并吹打成单细胞悬液。7、细胞计数,调整细胞密度按1.5×105/cm2种入6孔板内,放入CO2孵箱中培养。培养48h后换液并加入Ara-C使其终浓度为1×10-5mM/L。Ara-C作用24h后全量换液。以后每隔3天半量换液一次。【注意以下几点】1、上面的步骤是传统方法。有许多地方可以进行改动:如消化时可以直接用0.125-0.25的胰酶消化15-20min左右,也可用DNA酶进行消化,有人还直接进行吹打,都可行。2、上面虽然时大鼠皮层神经元,但是同样适用于小鼠,但是应该选择 孕
所示即为大鼠原代足细胞。按顺序:图1,2是培养7天传代前的图片,小球周围爬出很多细胞。图3,4是传代第二天细胞情况,过筛后仍有小的组织滤过。图5是传代7天足细胞完全分化图片。 由于本人实验刚有进展,好多图片制作不理想,后续的细胞免疫荧光坚持在做,失败过两次,出结果后再发,不过导师说了就是足细胞! 图1 图2 图3 图4 图5
的[5],但细胞得率均较低,而近些年来国外大多数方法采用以大脑皮质为材料、酶消化及梯度离心分离脑微血管段并进行原代培养[6~9,11,12]。由于原代培养中无法避免地混杂成纤维细胞、周细胞、平滑肌细胞、星型胶质细胞等其他细胞的生长,而且工作量大、过程繁琐且费用高[1],进行较纯的大鼠脑微血管内皮细胞原代培养一直是国内外的一个难点。 本人参照文献[6]、[7]、[8]的方法,成功地摸索出大鼠脑微血管内皮细胞分离和原代培养的方法,并获得纯度较高的脑微血管内皮细胞。 1.材料与方法 1.1 实验动物 每次
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