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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 细胞类型:
原代细胞
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 库存:
10
- 英文名:
Rat Primary Uterine Microvascular Endothelial Cells
- 生长状态:
贴壁培养
- 运输方式:
视天气状况和运输距离远近
- 细胞形态:
铺路石,不规则细胞
- 物种来源:
大鼠,其他咨询
- 组织来源:
实验动物的正常子宫组织
- 规格:
5*10^5
大鼠原代子宫微血管内皮细胞
子宫微血管排列呈树枝状,管径较细,微血管之间的间距较大,子宫毛细血管与静脉之间并不是直接连接,其间有一个窦状隙结构,窦状隙壁上得纤维网眼,像海绵一样,血液经过窦状隙时血浆向整个组织内渗透进行物质交换后再回到静脉中。
微血管作为分布最广的血管。它是连接微动脉和微静脉的血管。它们分支并互相吻合成网。管壁薄,通透性强。其功能是利于血液与组织之间进行物质交换。
微血管管壁主要由一层内皮细胞和基膜组成。细的毛细血管横切面由一个内皮细胞围成。
基础信息
细胞名称:大鼠原代子宫微血管内皮细胞(Rat Primary Uterine Microvascular Endothelial Cells, REMEC)
货号:XY-yd0712(烜雅生物)
规格:5×10⁵ cells/T25 培养瓶 / 冻存管
种属:大鼠
组织来源:正常子宫微血管组织
应用:生殖医学、血管生成、妊娠机制、子宫疾病研究;仅科研用,不可临床 / 诊断
细胞特性
形态:典型铺路石样、不规则多边形,贴壁生长
鉴定标记:vWF、CD31 免疫荧光阳性;DiI-Ac-LDL 摄取功能阳性
纯度:≥90%
无菌检测:支原体、细菌、真菌、HIV-1、HBV、HCV阴性
传代能力:推荐3–5 代,1:2 传代,2–3 天换液
倍增时间:约 48–72h
培养体系
完全培养基:专用内皮细胞培养基
包被:0.1% 明胶预包被培养瓶
培养条件:37℃、5% CO₂、饱和湿度(70%–80%)
换液:每 2–3 天半量换液
消化:0.25% 胰蛋白酶,37℃ 1–2min,血清终止
冻存与运输
冻存液:90% FBS + 10% DMSO;或无血清冻存液
保存:液氮(-196℃)长期;-80℃≤1 个月
运输:干冰冷链运输
复苏:37℃水浴快速融化,离心去 DMSO,接种包被培养瓶,静置过夜恢复贴壁
质量控制
形态学:倒置显微镜观察铺路石样、无杂细胞
免疫荧光:vWF/CD31 阳性率≥90%
微生物:无菌、无支原体、无病毒
活力:复苏存活率≥85%
注意事项
仅用于科学研究,不可用于临床治疗或人体 / 动物诊断
避免反复冻融,复苏后尽快接种,24h 内不换液
传代不超过 5 代,否则形态 / 功能易退化
培养用耗材建议明胶包被,增强贴壁与生长
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文献和实验大鼠原代子宫微血管内皮细胞
的[5],但细胞得率均较低,而近些年来国外大多数方法采用以大脑皮质为材料、酶消化及梯度离心分离脑微血管段并进行原代培养[6~9,11,12]。由于原代培养中无法避免地混杂成纤维细胞、周细胞、平滑肌细胞、星型胶质细胞等其他细胞的生长,而且工作量大、过程繁琐且费用高[1],进行较纯的大鼠脑微血管内皮细胞原代培养一直是国内外的一个难点。 本人参照文献[6]、[7]、[8]的方法,成功地摸索出大鼠脑微血管内皮细胞分离和原代培养的方法,并获得纯度较高的脑微血管内皮细胞。 1.材料与方法 1.1 实验动物 每次
抗人CD105单克隆抗体(NeoMarkers),兔抗人CD34、CD31多克隆抗体(Antibody Diagnostica Inc),兔抗人vW因子多克隆抗体(华美公司),抗兔及抗鼠ABC试剂盒、DAB显色试剂盒为华美公司产品,其他试剂均为国产分析纯以上级别。 3、方法: 植块法原代细胞培养: 细胞培养瓶的处理:选用50ml玻璃培养瓶,高压蒸汽灭菌,瓶底铺自制鼠尾胶(制作方法参见2),移入80℃烤箱烤干,临用前用消毒D-Hanks平衡盐缓冲液冲洗3次
原代微血管内皮 细 胞( Primary Microvascular Endothelial Cells )的体外分离培养 微血管内皮细胞生长因子的应用和免疫磁珠技术的发展,使微血管内皮细胞的培养和纯化变得相对简化。 1、微血管内皮细胞培养简述人体主要器官和组织的微血管内皮细胞已经培养成功的有:骨骼肌、心、脑、胃、视网膜、肺、皮肤、脉络膜、小肠、脂肪、肝窦、肾、关节滑膜、胎盘、骨髓、胰岛、角膜及食道等器官组织的微血管内皮细胞。 2、微血管内皮细胞的分离目前分离内皮细胞的方法主要有三种
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