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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 细胞类型:
原代细胞
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 库存:
10
- 英文名:
Human coronary artery smooth muscle cells
- 生长状态:
贴壁培养
- 运输方式:
视天气状况和运输距离远近
- 细胞形态:
长梭形细胞,不规则细胞
- 物种来源:
人,其他咨询
- 组织来源:
人的正常心脏组织
- 规格:
5*10^5
人原代冠状动脉平滑肌细胞
冠状动脉是供给心脏血液的动脉,起于主动脉根部,分左右两支,行于心脏表面。冠状动脉疾病发生和发展的一个主要因素是由于血管平滑肌细胞转变成为了具有繁殖能力的表型。近期的研究表明平滑肌细胞能表达钙离子通道,ICAM-1和VCAM-1。其中ICAM-1和VCAM-1的表达可能是造成血管壁炎症反应,并进一步造成血管疾病的原因 。因此,对冠状动脉血管平滑肌细胞的体外培养和研究可用来发现和确定新的冠状血管疾病的靶向治疗方法。
基本信息
产品名称:人原代冠状动脉平滑肌细胞(HCASMC)
组织来源:人的正常心脏组织
细胞类型:血管平滑肌细胞(VSMC)
形态特征:贴壁生长,长梭形 / 不规则三角形,成纤维细胞样
鉴定标记:α-SMA(平滑肌肌动蛋白)阳性,Factor VIII 阴性(排除内皮细胞)
纯度:≥90%;无支原体、细菌、真菌、HIV、HBV、HCV 污染
规格与批次
冻存规格:P2–P3 代冻存,1.8 mL 冻存管,≥5×10⁵ 活细胞 / 支,活率≥85%
运输:干冰运输;收到后液氮长期保存,−80℃可存 1 个月
批次信息:每批次来自单一供体,提供 COA(含供体信息、细胞质量、检测结果)
培养体系
推荐培养基:专用平滑肌细胞培养基(含低血清、生长因子、抗生素)
基础培养基:血管细胞基础培养基 + 平滑肌生长添加剂
培养条件:37℃、5% CO₂、饱和湿度;T25 瓶接种密度 1–2×10⁵ 个 / 瓶
传代:1:2 传代,每周 2–3 次换液;有限传代(≤8 代)
质量控制
细胞活性:台盼蓝染色,复苏活率≥85%
纯度鉴定:α-SMA 免疫荧光阳性率≥90%
微生物检测:支原体(PCR)、细菌 / 真菌(培养)阴性
病原体检测:HIV-1、HBV、HCV 阴性
倍增能力:≥15 次群体倍增,维持平滑肌表型
使用与安全
仅限科研:不可用于人体 / 动物临床,不可用于活体诊断
操作规范:无菌操作,二级生物安全柜;避免反复冻融
废弃处理:按生物危害废物高压灭菌后丢弃
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文献和实验人原代冠状动脉平滑肌细胞
实验步骤(一)、取SD 大鼠一只,实验时断椎处死。(二)、在无菌条件下快速自肛门上2 cm 取结肠10 cm 左右,生理盐水中反复灌肠冲洗。(三)、移入含300 U/ml青霉素、300 U/ml 链霉素的HepesRinger缓冲液中浸泡,肠段内外各15 min。(四)、将经抗生素浸泡过的肠段移入含Hepes Ringer缓冲液的塑料培养板中(培养板预先铺上705胶),在体视显微镜下沿肠系膜对侧纵行切开肠段,皮内针固定好四角,仔细地刮除粘膜层,翻转至外侧,小心地撕去肠系膜,再仔细地刮去浆膜
1、麻醉后消毒,下腹正中切口于膀胱颈(结扎处远端约1~2cm),严格无菌操作取出标本、手术台位于超净台旁2、在超净台,40u/ml庆大霉素溶液中浸泡5分钟3、生理盐水漂洗1次4、D-hanks液漂洗1次5、放入D-hanks液中,除去粘膜、粘膜下及浆膜如果是Shame组兔,以10ml注射器抽取约8ml D-hanks液,于粘膜层下注射起泡后,剪去粘膜层,直接剪取平滑肌组织,弃浆膜层及其上未剪下之肌组织。new: 如果是不全BOO兔,则可将膀胱剪成宽约0.5cm之条状,撕去粘膜层后,助手以一眼
培养液:MEM(GIBCO),20%FBS,双抗100IU/ml; 原代细胞培养:取5kg左右兔空气栓塞法处死后断头,于无菌条件下从枕大孔处用大止血箝扳开颅骨暴露并小心取出脑组织放入装有DMEM的培养皿中,用眼科镊分离基底动脉后按常规平滑肌方法贴块培养。 传代: (1)吸除培养瓶内旧培养液。 (2)D-Hanks液冲洗2遍。 (3)加入消化液少许,以能覆盖瓶底为限。 (4)倒置显微镜观察发现细胞胞质回缩、细胞间隙增大时,立即终止消化。 (5)吸除消化液,向瓶底注入D-Hanks液
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