2H-Furo[2,3-c]pyran-2-one，8570

非同位素银染测序系统操作技术

。如果你无法确定使用何种模式，建议从模式1开始。 　　 　　模式1：适用于引物 　　95℃ 2分钟。然后： 95℃ 30秒(变性), 42℃ 30秒(退火), 70℃ 1分钟(延伸)。 　　 　　模式2:适用于≥24碱基或略短的GC含量≥50%的引物。 　　95℃ 2分钟, 然后: 95℃ 30秒(变性), 70℃ 30秒(退火/延伸)。 4. 在加入终止溶液之后样品可在4℃保存过夜。 　　（二）、 测序凝胶板的制备 　　1、玻璃板的处理： 　　银染测序

测序（sequencing）技术

。因为这些原因，应该使用尽可能高的退火温度。对于有牢固二级结构的模板建议使用95℃变性、70℃退火/延伸的循环模式。一般来说，较长的引物及GC含量高的引物能得到较强的信号。实验结果表明，>24mer的GC含量约为50%的引物可得到最佳结果。 　　由于本系统采用热循环装置, 与常规的测序方法相比具有如下几点好处：(1).本方法线性扩增模板DNA 产生足够的产物使银染技术能够检测序列条带，测序反应需要0.03--2pmol模板DNA , 随模板种类而定。(2). 在每一个变性循环中的高温可以取代对双链

HPLC基础知识培训教程(二)

　　分离度(resolution，R)――相邻两峰的保留时间之差与平均峰宽的比值。也叫分辨率，表示相邻两峰的分离程度。R＝。当W1＝W2时，R＝。当R＝1时，称为4σ分离，两峰基本分离，裸露峰面积为95.4%，内侧峰基重叠约2%。R＝1.5时，称为6σ分离，裸露峰面积为99.7%。R≥1.5称为完全分离。 　　《中国药典》规定R应大于1.5。 　　基本分离方程――分离度与三个色谱基本参数有如下关系: 　　R＝×× 　　其中称为柱效项，为柱选择性项，为柱容量项