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种属 | 小鼠 |
组织来源 | 正常胸主动脉组织 |
传代比例 | 1:2传代 ,消化2-3分钟。 |
完全培养基配置 | 基础培养基500ml ;生长添加剂5ml ;胎牛血清50ml ;双抗5ml |
简介 | 血管疾病发生和发展的一个主要因素是由于血管平滑肌细胞(smooth muscle cells, SMCs)转变成为了具有繁殖能力的表型。近期的研究表明平滑肌细胞能表达钙离子通道 ,ICAM-1和VCAM-1。其中ICAM-1和VCAM-1的表达可能是造成血管壁炎症反应 ,并进一步造成血管疾病的原因 。因此 ,对血管平滑肌细胞的体外培养和研究可用来发现和确定新的血管疾病的靶向治疗方法。 |
形态 | 长梭状细胞样 ,不规则细胞样 |
生长特征 | 贴壁生长 |
细胞检测 | 平滑肌肌动蛋白 (α-SMA)免疫荧光染色为阳性免疫荧光鉴定 ,细胞纯度可达90%以上 ,不含有HIV-1、HBV、 HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 |
倍增时间 | 每周 2 至 3 次 |
换液频率 | 2-3天换液一次 |
培养条件 | 气相:空气 ,95%;二氧化碳 ,5%。 温度:37摄氏度 ,培养箱湿度为70%-80%。 |
冻存条件 | 冻存液:90%FBS ,DMSO 10%, 或使用非程序冻存液: |
产品使用 | 仅限于科学研究 ,不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。 |







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文献和实验培养了快一个月的细胞了,今天终于鉴定出是我想要的血管平滑肌细胞。我养的是大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞,采用的是组织贴块法培养。10天后传第一代(图1),16天后第二代(图2),22天后第三代(图3),并做a-actin免疫细胞化学鉴定(图4)。 图1图2图3 图4典型的血管平滑肌细胞生长"hill and valley"现象。
组织化学染色。(α-SM-actin免疫组织化学鉴定)胰酶消化法培养平滑肌细胞1.1 试剂和动物胰酶购自Sigma公司;α-actin抗体购自中山生物技术有限公司;PBS液各成分均为市售分析纯;新生小牛血清购自HyClone;DMEM为Gibco产品。雄性Wistar大鼠(2只,体重175±25 g)购自中国医学科学院实验动物中心。1.2 胰酶消化法原代培养Wistar大鼠处死,迅速取出胸主动脉,浸泡在含无菌PBS的表面皿中,转移到无菌超净台。在表面皿中漂洗主动脉去除残留的血迹,纵向剪开主动脉,把主动脉铺平
消化法原代培养兔胸主动脉平滑肌细胞用DMEM配0.2%的1型胶原酶(用20的血清的DMEM配可能更好,有类似文献),分装于青霉素小并,每并2-3ml。1只免的胸主动脉置于1瓶消化液中消化,消化约10几个小时(消化程度的把握要体会),离心后,接种(若见细胞量大,成功把握大),绝对静置3天(没必要看,看多了无益),8天可传代。犬胸主动脉平滑肌贴块法——方法成熟,比消化法好控制的多。1、取材过程要快,取好放4度储存的D-hanks液带入超净台,不然先天不足;2、块大小密度影响不是很大(尽量小),关键
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