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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海笃玛生物科技有限公司
- 库存:
999
- 灵敏度:
咨询
- 样本:
体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆等
- 标记物:
电询
- 适应物种:
人
- 应用:
科研实验
- 检测方法:
双抗夹心法
- 检测范围:
电询
- 规格:
96T/48T
| 规格: | 96T | 产品价格: | ¥1950.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 48T | 产品价格: | ¥1470.0 |
人(Human)成纤维细胞生长因子2(FGF2)ELISA检测试剂盒
该试剂盒仅用于科研实验
产品货号:DM-H333
产品规格:48/96T
一、ELISA 检测原理
ELISA(酶联免疫吸附测定)核心是抗原 - 抗体特异性结合 + 酶促显色反应,通过颜色深浅反映待测物浓度。常用类型及原理:
1. 双抗体夹心法(测大分子抗原 / 蛋白)

固相包被捕获抗体 → 加入样本(待测抗原)→ 结合酶标检测抗体 → 加底物显色 → 吸光度与抗原浓度正相关。





2. 间接法(测抗体)固相包被抗原 → 样本中待测抗体结合 → 加酶标二抗 → 底物显色 → 吸光度与抗体浓度正相关。

3. 竞争法(测小分子抗原 / 半抗原)待测抗原与酶标抗原竞争结合有限抗体 → 待测物越多,显色越浅 → 吸光度与浓度负相关。

二、试剂盒的组成

三、ELISA实验所需材料
(一)试剂盒本身(核心)
1. 预包被酶标板(96 孔)
2. 标准品(梯度浓度)
3. 酶结合物(酶标抗体 / 酶标抗原)
4. 样本稀释液
5. 洗涤液(浓缩液,使用前稀释)
6. 显色底物液(A、B 液或单液)
7. 终止液
8. 封板膜 / 封板胶
(二)样本相关
1. 待测样本(血清、血浆、细胞上清、组织匀浆等)
2. 样本处理试剂(视样本类型):
抗凝剂(EDTA、肝素、柠檬酸钠等)
蛋白酶抑制剂(如组织样本)
裂解液、匀浆缓冲液等

(三)仪器设备
1. 酶标仪(450 nm 为主,部分需双波长)
2. 洗板机(推荐)或洗板瓶 / 排枪
3. 移液器(0.5–10 μL、10–100 μL、100–1000 μL)
4. 移液器吸头(带滤芯更佳)
5. 涡旋振荡器
6. 离心机(样本处理用)
7. 恒温培养箱 / 水浴(37℃ 孵育用)
8. 冰箱(2–8℃、-20℃)
(四)耗材与辅助用品
1. EP 管、冻存管
2. 一次性手套、口罩
3. 吸水纸 / 滤纸
4. 计时器
5. 去离子水 / 蒸馏水(用于洗涤液稀释)
6. 废液缸、吸水纸
(五)可选 / 特殊实验材料
1. 封板膜 / 封板胶
2. 振荡器(微孔板摇床)
3. 多道移液器(8/12 道)
4. 加样槽
5. 微孔板封口膜、铝箔(避光)
四、试剂准备的注意事项
1.所有试剂按说明书指定温度保存(2–8℃ 或 -20℃)
2.避免阳光直射,酶结合物、底物需避光
3.不同批号试剂不可混用
4.加样前检查试剂是否浑浊、沉淀、变色,异常则弃用
5.所有试剂开盖后尽快使用,剩余按要求保存
五、结果计算(通用流程)
1. 数据处理
(1)扣除空白孔 / 本底孔吸光度(OD),得到校正 OD 值。
(2)以标准品浓度为 X,校正 OD 为 Y,做标准曲线(常用四参数拟合 4PL)。 2.浓度计算
(1)样本 OD 代入标准曲线,得到理论浓度 C₀。
(2)若样本经稀释,最终浓度:C=C0×稀释倍数
2. 有效性判定(常见)
(1)空白 OD 通常 ≤ 0.1;
(2)标准曲线 R² ≥ 0.98;
(3)质控(QC)在可接受范围;
(4)样本 OD 超出曲线上限 / 下限时需重新稀释 / 浓缩复测。

六、示例(双抗体夹心法)
标准品浓度:0、10、20、50、100、200 pg/mL
测得 OD:0.05、0.12、0.25、0.58、1.10、1.95
校正后 OD:0、0.07、0.20、0.53、1.05、1.90
拟合曲线后,某样本校正 OD=0.35 → 曲线读出 C₀≈30 pg/mL若样本稀释 5 倍,则最终浓度 = 30 × 5 = 150 pg/mL。



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