人原代子宫平滑肌细胞

人原代子宫平滑肌细胞
子宫是产生月经和孕育胎儿的器官，位于骨盆腔中央，在膀胱与直肠之间。
卵巢分泌的性激素能刺激子宫平滑肌纤维，而引起与性周期相应的肥大和增生。另外，妊娠时子宫肌层的平滑肌纤维，可肥大到哺乳类平滑肌的最大值。分娩时子宫肌能对脑垂体后叶激素的催产素发生反应而收缩。
子宫肌层较厚，非孕时20px，由大量平滑肌束和少量弹力纤维组成，分为内层（肌纤维环形排列）、中层（肌纤维交叉排列）、外层（肌纤维纵行排列）3层。子宫收缩时压迫血管能有效控制子宫出血。

基本特性
组织来源：手术切除的正常子宫组织
形态：贴壁生长，典型长梭形 / 纺锤形，胞质丰富、核居中；原代初期可见三角形 / 多角形，汇合后呈束状排列。
鉴定标志物：α-SMA（平滑肌肌动蛋白）、Desmin（结蛋白） 阳性；纯度通常 > 90%。生理功能：介导子宫收缩（分娩、经血排出）、妊娠期增生肥大、激素响应（雌激素 / 孕激素 / 催产素）。

培养体系（标准方案）
培养基：专用完全培养基（推荐配方：DMEM/F12 + 10–15% FBS + 1% 双抗 + 生长添加剂）。
培养条件：37℃、5% CO₂、饱和湿度。
传代：
汇合度 80–90% 传代，1:2 分瓶，每周 2–3 次。
消化：0.25% 胰蛋白酶 - EDTA，37℃ 2–3min，血清终止。
冻存：90% FBS + 10% DMSO，程序降温后液氮保存。

分离方法（酶消化法）
取材：无菌取正常子宫肌层组织，预冷 PBS 冲洗，去除内膜 / 外膜 / 血管。
剪碎：剪成 1mm³ 小块。
消化：0.1% 胶原酶 I + 0.25% 胰蛋白酶，37℃振荡 30–60min。
终止：加含血清培养基中和，过滤（100μm 筛），离心（1000rpm×5min）。
接种：完全培养基重悬，密度 1×10⁶/mL，37℃培养，24h 换液去除未贴壁细胞。

注意事项
有限传代：原代细胞传代次数有限（P3–P5 后增殖放缓），建议 P1–P3 用于实验。
表型转换：体外培养易从收缩型向合成型转变（Desmin↓、Vimentin↑），影响功能实验。
污染防控：严格无菌，双抗（青霉素 / 链霉素）常规添加，警惕支原体污染。

常见问题
细胞不贴壁：接种密度低、培养基血清质量差、培养皿未包被（可试用0.1% 明胶包被）。
生长缓慢：血清浓度不足、生长因子缺失、传代过密，建议换专用培养基并控制密度。
形态异常：污染、老化或分化异常，建议用 α-SMA 染色鉴定纯度。

产品使用
1) 本产品仅能用于科研
2)本产品未通过直接用于活体动物和人的审核
3)本产品未通过用于活体诊断的审核