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- 文献和实验
- 技术资料
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100
- 供应商:
无锡莱弗思生物实验器材有限公司
- 规格:
96支/盒,50盒/箱
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文献和实验采用回收的聚丙烯(这种情况下,我们只能说它的主要成分是聚丙烯),这类吸头一般柔软性很差,吸头壁较厚。而柔软性差的吸头容易导致吸头与移液器的密封一致性差;吸头壁厚则容易使液体残留,且排液不灵活。 二、 吸头的制造和生产工艺 除了吸头原材料之外,大多数吸头在制造的过程中还会加入显色材料和少量的添加剂,比较常见的有: 1. 显色材料。市场上俗称的蓝色吸头(1000μL)和黄色吸头(200μL),就是在聚丙烯中加入了相应的显色材料。显色材料需要用高品质的色母粒,而非低廉的工业
从原代构建到多组学验证,肾小管类器官慢病毒工程化标准操作Protocol!
加入500μLTrypLE,37℃孵育5分钟。 4.机械解离类器官:将无滤芯10μL吸头套在带滤芯1000μL吸头上,反复吹打20次(图B)。 关键注意:镜下观察若仍有大量完整类器官,需重复37℃TrypLE孵育5分钟+机械解离步骤(图2C、2D) 5.BME重悬细胞沉淀并接种: a.轻柔吹打重悬沉淀,避免产生气泡。 b.按沉淀体积的70%-75%加入BME。 c.用200μL移液器轻柔重悬,向预热多孔板滴加20μL液滴:24孔板每孔3滴,12孔板每孔6滴,6孔板每孔10滴。 6.小心倒置培养板,37℃
坚实的液滴。 ⑥将含类器官的BME以每滴约10μl的体积接种于预热的24孔悬浮细胞培养板底部,每孔接种3-4滴。 关键提示: 类器官重悬于BME后,应尽快进行接种,因为BME可能会在试管或移液器吸头中凝固。 培养板应提前置于37℃湿润培养箱中过夜预热。若预热不充分,BME液滴会在培养板表面立即变平,类器官更容易贴附于培养板底部。 不要直接将培养基加在BME液滴上方,以免破坏液滴。 ⑦将培养板置于37℃、5%(体积分数)CO₂的湿润培养箱中培养。 ⑧每2-3天小心吸去孔中的培养基,更换为新鲜
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