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- 2026年04月15日
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文献和实验% ），这使得化学合成siRNA 的成本升高。体外转录制备长片断RNA 并不难，但是由于研究表明长片断的双链RNA （>29bps ）在哺乳动物细胞中通常会引发抗病毒反应―― 一种非特异基因表达抑制，而目前体外转录往往无法制备小于29bp 的小分子siRNA s 。一个新的研究发现，用RNase III 降解长片断双链RNA 成为siRNA s 库也能够有效诱导特异的基因沉默，这样可以避免了筛选有效siRNA s 的漫长过程，从而快速，经济的实现特定基因表达的沉默。在线虫、果蝇和其他一些物种的RNA 干扰
Polymerase III in vitro Transcription
: 4.0 μl 5X Pol III transcription buffer 0.2 μl 0.1 M DTT 0.2 μl alpha amanatin (1 mg/ml) 0.2 μl RNAse Inhibitor H2O to a final volume of 16 microliters less the maximum volume of protein to be added. Aliquot the second mix to all reaction tubes
Polymerase III in vitro Transcription
except protein: 4.0 ul 5X Pol III transcription buffer 0.2 ul 0.1 M DTT 0.2 ul alpha amanatin (1 mg/ml) 0.2 ul RNAse Inhibitor H20 to a final volume of 16 microliters less the maximum volume of protein to be added. Aliquot the second mix to all reaction
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