LNCaP clone FGC/GFP完全培养基

利用人工组合转录因子对人类基因组扫描

I and Nhe I and ligated with 3 g of Xma I- and Nhe I-digested inserts to generate the pComb3X-6ZF library vector. Both 3ZF and 6ZF library inserts were digested with SfI I and subcloned into the retroviral vector pMX-IRES-GFP, containing the VP64 activation

如何有效提高转染效率

的难以转染，所以寻找高效的转染试剂应对这类型细胞就显得尤为重要。细胞在不同分裂期，摄取并表达外源 DNA 的能力也有显着性差异。因此选择合适的培养状态的细胞对转染也有着不小的影响，此外还常用一些促有丝分裂刺激物（条件培养基，生长因子，滋养细胞）来活化原代培养细胞。细胞在冻存复苏后一到两代或直到它们完全复苏之前都是很难转染的，但是传代次数过多，对于转染而言，在不同细胞系中表现出来的差异也很大。有些细胞系传代很多次还能够保证很高的转染效率，而其他一些细胞系则传代很少次数转染效率就有显着差异。因为有些细胞

细胞问题解答集锦

表达，也浓缩过再做ELISA WB，都没有。时间挺长了，实在等不及了，就想稳定转染cho-k1细胞系，通过MSX来筛选，加压25UM的MSX，结果还不到两个星期，CHO全死了，不知道怎么回事。如果有表达的话，应该是分泌表达的，但是怎么我总是做不出来呢？质粒纯度和浓度都应该没问题，到底哪里我还没有考虑到？ 答：提三点建议： (1)用MSX筛选之前最好做预实验，摸出其最小有效浓度，然后用这个浓度去筛选阳性克隆； (2)试试间断筛选，就是筛选一周到10天，换压力培养基为完全培养基，细胞状态好转后，再立