sNF96.2完全培养基

类器官培养与应用——心脏类器官

，1% penicillin-streptomycin，200mM L-ascorbic）终止消化，将所得细胞用 100μm 孔径滤膜过滤。   hCOs 培养 12、将细胞用 hCOs 形成培养基（I）重悬并进行细胞计数，按照 5,000 个/孔的密度接种于低吸附 96 孔板中。4℃ 条件下 300g 离心 3 min 后，放置在 37℃，5%CO2 的培养箱中过夜培养。 13、用 Matrigel 将每孔细胞进行包埋，放置于 37℃ 培养箱中使 Matrigel 固化。添加 hCOs 形成培养基（II）至完全没过

MTT实验心得

点200 微升，那么就将细胞浓度再稀释4倍就可以正式点板了，这时顺便将细胞进行计数（因为实验记录要求写啊）。这样就OK了！如果细胞还太多，将细胞稀释4倍后再重复以上操作。注意：不要过分信赖细胞计数，因为细胞计数的取样量为20 微升左右，由于颗粒的分布不均匀，代表性是很差的。建议：细胞计数一定要会，但不要完全依赖它。点板时一定要将细胞消化成单个细胞，而且一定要混匀，最好用排枪，否则，MTT的SD会狂大。2、点板布局。其实这一点很多人不懈一顾。如果你的细胞要养48 h或更长，建议不要吝啬96-孔板

酵母双杂交系统的建立与发展

的酵母菌株在缺乏尿嘧啶的选择性培养基上只有当“ 诱饵” 和“ 猎物” 相互作用激活URA3 基因的表达才能生长。在含有5-FOA 的完全培养基上“ 诱饵” 和“ 猎物” 的相互作用则抑制细胞的生长。然而如果目的蛋白，即与DB 或AD 融合的蛋白质发生了突变或者由于外加药物的干扰不再相互作用，URA3 基因不表达，则细胞能在含有5-FOA 的完全培养基上生长。通过这种方法，Vidal 等人筛选到了转录因子E2F1 的突变物，这些突变物仍然能结合视网膜母细胞瘤蛋白RB，但是丧失了同另外一种称为DP