链霉亲和素磁珠(300nm) Streptavidin Ma

产品简介
链霉亲和素-生物素（SA-Biotin）系统具有极高的结合亲和力（Kd=10^-15），在生物领域具有广泛的应用。Streptavidin采用蛋白偶联技术将SA共价连接于固相载体表面，可高效结合生物素化抗体、核酸、蛋白等配体分子。本产品采用超顺磁性微球，粒径均一、形貌规整，有利于方便、快捷地捕获目标分子以及实现磁性分离。本产品可配套自动化设备进行高通量操作。

产品信息
粒径：   300nm
生物素化单链寡核苷酸(24nt)（pmol/mg 磁珠）：   ≥450 
生物素化 IgG（μg/mg 磁珠）：   ≥15
磁珠浓度：   10mg/mL
磁珠表面：   亲水基团
保存溶液：   1×PBS，含 0.1%（W/V）BSA，0.1%（V/V）proclin-300
保存条件及有效期：   2~8℃保存，有效期2年（可在常温下短时间储存或运输）

结合生物素化分子操作流程（本操作适用于链霉亲和素磁珠系列所有产品）

1. 使用前准备
1.1 缓冲液：以下为常用的缓冲液成分，用户可根据需要调整缓冲液的盐浓度及 pH
1.2 Buffer I（适用于结合生物素化核酸）：10mM Tris-HCl（pH7.5），1 mM EDTA，1 M NaCl，0.01%~0.1% Tween-20
1.3 Buffer II（适用于结合生物素化抗体/蛋白）：PBS，pH 7.4，含0.05% Tween-20，可根据需要添加0.01%~0.1% BSA
1.4 化学发光Washing buffer：用户根据需求配制洗液，使用时平衡至室温
1.5 磁性分离器
1.6 漩涡振荡器
1.7 旋转混合仪
1.8 移液器及吸头
1.9 合适的离心管

2. 结合生物素化核酸
2.1. 将磁珠瓶置于漩涡振荡器上20s，振荡重悬磁珠。用移液器移取100μL磁珠到新的离心管中。将离心管置于磁性分离器上，静置1min（此操作后续简称为磁性分离），用移液器吸去上清液，从磁性分离器上取下离心管。
备注：用户可根据生物素化分子的多少，参考产品信息表中磁珠的载量，计算需要取用的磁珠量。建议生物素化分子的加入量为磁珠载量的1~2倍，使磁珠饱和。
2.2. 加入1mL Buffer I到离心管中，盖上离心管盖，充分振荡重悬磁珠。磁性分离，移去上清液。
备注：当步骤2.1取用磁珠体积大于1mL时，加入与磁珠体积相同的Buffer I。
2.3. 重复“步骤2.2”一次。
2.4. 加入500μL的用Buffer I稀释的生物素化核酸（使磁珠浓度为2mg/mL），充分振荡重悬磁珠。将离心管置于旋转混合仪上，室温旋转混合30min。
2.5. 磁性分离，将上清液转移至新的离心管。
2.6. 按“步骤 2.2”的方法洗涤磁珠三次。
2.7. 根据后续实验的要求，加入合适的低盐缓冲液，重悬磁珠。至此结合生物素化核酸步骤完成。磁珠可用于后续操作。
2.8. 用户可以通过测定反应前后核酸的浓度，计算结合到磁珠上的核酸量﹝（反应前浓度-反应后浓度）×反应溶液体积﹞。

3. 结合生物素化抗体/蛋白操作流程
3.1 将磁珠瓶置于漩涡振荡器上20s，振荡重悬磁珠。用移液器移取100μL磁珠到新的离心管中。磁性分离，用移液器吸去上清液，从磁性分离器上取下离心管。
备注：用户可根据生物素化分子的多少，参考产品信息表中磁珠的载量，计算需要取用的磁珠量。建议生物素化分子的加入量 为磁珠载量的 1~2 倍，使磁珠饱和。
3.2 加入1mL Buffer II到离心管中，盖上离心管盖，充分振荡重悬磁珠。磁性分离，移去上清液。
备注：当步骤 3.1 取用磁珠体积大于1mL时，加入与磁珠体积相同的Buffer II。
3.3 重复“步骤3.2” 两次，共洗涤三次。
3.4 加入1mL用Buffer II稀释的生物素化抗体/蛋白（使磁珠浓度为1mg/mL），充分振荡重悬磁珠。将离心管置于旋转混合仪上，室温旋转混合60min。
3.5 磁性分离，将上清液转移至新的离心管。
3.6 按“步骤3.2”的方法洗涤磁珠五次。
3.7 根据后续实验的要求，加入Buffer II或其他合适的缓冲液，重悬磁珠。至此结合生物素化抗体/蛋白步骤完成。磁珠可用于后续操作。 

4.磁微粒化学发光免疫诊断操作流程
4.1 调整磁珠至合适浓度（建议0.2-0.8mg/ml），将磁珠置于漩涡振荡器上20s，振荡重悬磁珠。用移液器移取50μL磁珠至96孔板中，磁性分离，用移液器吸去上清液，从磁性分离器上取下96孔板。
4.2 每孔加入100μL生物素化捕获抗体，充分震荡重悬磁珠，37℃恒温箱中孵育15min后，磁性分离，用移液器吸去上清液，从磁性分离器上取下96孔板。
4.3 每孔加入200μL的Washing buffer，充分震荡重悬磁珠，磁性分离，用移液器吸去上清液，从 磁性分离器上取下96孔板，该步骤再重复2次，共洗涤3次。
4.4 每孔加入50μL待测物标准品或待测样本，充分震荡重悬磁珠，37℃恒温箱中孵育15min后，磁性 分离，用移液器吸去上清液，从磁性分离器上取下96孔板。
4.5 每孔加入200μL的Washing buffer，充分震荡重悬磁珠，磁性分离，用移液器吸去上清液，从磁性 分离器上取下96孔板，该步骤再重复2次，共洗涤3次。
4.6 每孔加入100μL酶标记抗体，充分震荡重悬磁珠，37℃恒温箱中孵育15min后，磁性分离，用移液 器吸去上清液，从磁性分离器上取下96孔板。
4.7 每孔加入200μL的Washing buffer，充分震荡重悬磁珠，磁性分离，用移液器吸去上清液，从磁性 分离器上取下96孔板，该步骤再重复2次，共洗涤3次。
4.8 每孔加入150μL的底物液，充分震荡重悬磁珠，避光孵育5min。
4.9 将96孔板放入化学发光仪读数，并进行相应数据处理。

注意事项
1. 应避免对磁珠进行冷冻等操作。
2. 为减少磁珠损失，每次磁性分离的时间应不少于1min。
3. 从磁珠保存管中移取磁珠前应充分震荡重悬均匀。操作过程中应避免产生气泡。
4. 建议使用质量好的移液器吸头和反应管，避免因粘附磁珠及溶液而造成损失。
5. 生物素化分子的大小会影响磁珠的载量。用户需要根据实验确定磁珠对特定生物素化分子的载量。
6. 生物素化分子的加入量应为磁珠载量的1~2倍，以使磁珠饱和。
7. 如需生物素与SA 磁珠分离，可采用： 方法一：0.1% SDS，煮沸5min；方法二： pH=8.2，含95%甲酰胺的10mM EDTA中，65℃ 5min或90℃ 2min。脱落率95%。
8. 本产品仅供研究使用。