Anti-HA (抗HA磁珠) Anti-HA Magnet

产品简介
HA-tag蛋白纯化磁珠（Anti-HA Magnetic Beads），是由高品质的HA小鼠单克隆抗体与纳米级羧基磁珠共价偶联而成，可特异性地与动植物或微生物裂解液、血清、腹水等中含有HA标签的融合蛋白结合，并可以借助磁力架等磁分离设备非常便捷地应用于带有HA标签的融合蛋白或其蛋白复合物的免疫沉淀(Immunoprecipitation, IP)、免疫共沉淀(Co-IP)或纯化等实验。

产品信息
Concentration：   10mg/mL magnetic beads in specific protective buffer
Size of beads：   ~300nm
Type of magnetization：   Superparamagnetic
Coupled antibody：   Anti-HA mouse monoclonal antibody
Isotype：   IgG1
Binding capacity：   ≥ 0.6 mg HA‐tagged fusion protein per ml beads
Specificity：   Met-HA-Protein, HA-Protein, Protein-HA
Elution method：   SDS‐PAGE loading buffer elution, or acid, peptide competitive.
Application：   IP, Co-IP, Protein purification
Storage：   2-8℃ , 1 year

产品优势
● 本产品特异性强、靶蛋白结合率高。
● 超顺磁性和高磁响应性，节省操作时间。
● 良好的分散性和重悬性，提高操作的便捷性。
● 良好的物理化学稳定性，保障重复性效果。

使用说明
A. 样品的制备
1. 推荐使用商业化的IP裂解液，用于制备细胞或组织的裂解液。如果使用自行配制的裂解液，需要确保裂解液的pH为6-8。
2. 新鲜制备好的样品，建议尽量当天完成免疫沉淀或免疫共沉淀、标签蛋白的纯化等操作；若样品不能当天使用，也可以适当分装后-80ºC冻存，但可能影响效果。
B. Anti-HA 磁珠的准备
由于Anti-HA磁珠储存在特殊保护液中，所以需要在加入样品前适当洗涤。
1. 轻轻重悬Anti-HA磁珠，按照每500μl样品加入10~20μl磁珠悬浊液，取适量Anti-HA磁珠至一干净离心管中，加入1×PBS至最终体积为约0.5ml。
2. 充分重悬Anti-HA磁珠，然后置于磁力架上分离10秒，去除上清。重复上述步骤两次。
3. 按照初始体积的量，用1×PBS重悬Anti-HA磁珠。
C. 免疫沉淀(Immunoprecipitation, IP)
1. 加入磁珠并孵育。按照每500μl蛋白样品加入10~20μl磁珠悬浊液的比例加入Anti-HA磁珠，置于旋转混合仪上，4ºC孵育过夜或室温孵育2小时。
注：孵育过程中，如果磁珠发生聚团或呈片状属正常现象，不会影响实验结果。
2. 磁分离。孵育完毕后，置于磁力架上分离10秒，去除上清。
3. 洗涤。加入500μl的IP裂解液，并轻轻重悬Anti-HA磁珠。然后，置于磁力架上分离10秒，去除上清。重复洗涤三次。

D. 洗脱
根据标签蛋白的特点及后续实验要求，可以选择如下3种方法之一进行洗脱：
1. SDS-PAGE上样缓冲液洗脱法：本方法为变性法，加入适量1×SDS-PAGE上样缓冲液，然后，95 ~ 100°C持续煮5分钟，得到的蛋白样品适合SDS-PAGE电泳或WB检测。
2. HA 多肽竞争洗脱法：本方法为非变性法，洗脱效率高，且洗脱后的蛋白保持原有的生物活性，便于后续分析检测。
3. 酸性洗脱法：本方法为非变性法，比较快速且高效。洗脱后的蛋白保持原有的生物活性，便于后续分析检测。酸性洗脱法虽然高效，但仍可能低于竞争洗脱法或SDS-PAGE上样缓冲液洗脱法。

注意事项
1. 本产品需与磁性分离设备配套使用。
2. 冷冻、干燥和离心等操作常常会引起磁珠团聚，不易于重悬和分散，并且可能影响本磁珠的活性。
3. 在使用本产品前，请务必轻柔混匀并充分重悬磁珠呈均匀的悬浮状态。若用微量枪头吹打混匀，务必轻轻吹打，并建议提前剪掉尖头。
4. 本产品仅供科研使用。