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文献和实验时样本之间干扰。 Q:说明书上写细胞量为 1~5 × 105 ,细胞量多的话对检测结果有没有影响? A:建议细胞量最多不要超过 106个,过量的细胞相当于染料被稀释,影响染色和分离效果。一般 2×105 个细胞足够进行凋亡检测了,通常情况下检测 10,000 个细胞就能得到比较好的结果。 Q:是否可以用 PBS 替代凋亡试剂盒里面的 Binding Buffer? A:不行,Binding Buffer 是必须要加的,Annexin V 与 PS 的结合依赖 Ca2+,Binding
A quick RNA mini-prep for Neurospora mycelial cultures
at 3000g, 4°C in a fixed angle rotor. Make sure caps are screwed on tightly to prevent tubes from collapsing. 8. Pass supernatant through 50 micron Miracloth (Calbiochem #475855, La Jolla, CA) in a funnel into fresh Sarstedt tube. 9. Measure
General Protocol to Prepare Neuronal Cultures
made in step 2 (Hibernate-Ca containing 2mgs/ml of papain). Incubate for 30 minutes at 37°C. 5. Remove enzymatic solution, again careful not to disturb or remove tissue, add back 1 ml of media saved in 15 ml tube. 6. Using a 1 ml pipettor with a sterile
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