LDS 751 Nucleic Acid Stain 核酸染

产品描述

LDS 751是一种细胞膜通透性的核酸染色剂，用于从无核和受损的有核细胞中区分完整的有核细胞，以及在混合的中性粒细胞、淋巴细胞和单核细胞中用流式细胞术区分不同的细胞类型。LDS 751与dsDNA结合的最大激发波长~543nm，能用488nm氩离子激光器来激发，由于具有较长的最大发射波长 (∼712 nm) 而特别适用于多色分析。与dsDNA的结合引起~20倍的荧光增强。噻唑橙（主要结合RNA）和LDS 751（主要结合DNA）用来区分红细胞、血小板、网织红血球和有核细胞。

产品特性

1） CAS NO.：181885-68-7

2） 化学名：Quinolinium, 6-(dimethylamino)-2-[4-[4-(dimethylamino)phenyl]-1,3-butadienyl]-1-ethyl, perchlorate

3） 同义名：Laser dye styryl-751; LDS-751;

4） 分子式：C₂₅H₃₀ClN₃O₄

5） 分子量：471.98

6） 外观：固体

7） 溶解性：溶于DMSO

8） Ex/Em：~543⁄712nm（与DNA结合）

保存与运输方法

保存：-20°C避光干燥保存，至少1年有效。 

运输：冰袋运输。

注意事项

1）荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

染色步骤

【注意】：以下步骤适用于大多数细胞类型。生长培养基、细胞密度、是否存在其它细胞类型都可能影响染色。玻璃表面残留的去污剂也可能影响许多有机体的染色结果，在含或不含细胞的溶液内都可能看到明亮的染色材料。

1）制备5-10mM的DMSO储存液，比如：往25mg LDS 751粉末（Mw：471.98）内加入5.297ml DMSO充分溶解，即得到10mM的储存液，根据单次用量分装，置于-20℃避光保存，避免反复冻融。

2）加1-10µM染色工作液到细胞内（或悬浮细胞，或贴壁细胞），染色15-60min。第一次实验务必尝试几种染色浓度，以确定最佳的工作浓度。高染料浓度很可能引起其它细胞结构的非特异染色。

3）直接用合适的仪器比如流式细胞仪，荧光酶标板等来观察染色结果。

染色示例（来自文献，仅作参考）

文献1）Boero E, Brinkman I, Juliet T, van Yperen E, van Strijp JAG, Rooijakkers SHM and van Kessel KPM (2021) Use of Flow Cytometry to Evaluate Phagocytosis of Staphylococcus aureus by Human Neutrophils. Front. Immunol. 12:635825. doi: 10.3389/fimmu.2021.635825

实验目的：研究中性粒细胞对细菌的吞噬比例； 

实验方法：吞噬前和吞噬后的样本分别用FACSVerse流式细胞仪收集数据。为了同时获取细菌（~1 µm直径）和中性粒细胞（~12 µm），对数模式设置FSC和SSC参数。为了消除FSC和SSC的满程对数扩增引起的大量背景事件，吞噬后的中性粒细胞用LDS-751核酸染色剂（0.3 µg/ml） 于4℃孵育5min，不用冲洗。GFP（S. aureus）和LDS-751（PerCP 通道设置）（中性粒细胞）信号以对数形式收集，两者用作阈值信号。获取事件总数为50,000。