MUG 4-甲基伞型酮-beta-D-葡糖苷酸

GUS报告基因的定性和定量检测

2. 染色步骤 （1）染色：加入适量配制好的GUS 染液于24孔板的孔中，将待测样品浸到GUS染液中，将24孔板置于37℃保温箱中放置6 h。 （2）漂洗：先后用50%，70%，100%的乙醇漂洗样品，每次浸泡5分钟。 （3）脱色：加入100%乙醇浸泡直至完全脱色。 （4）记录：在体视显微镜下拍照记录。 二、GUS报导基因的定量检测 GUS 能与底物MUG（分子量352.3，4-甲基伞型酮-β-葡萄糖醛酸苷，4-methylumbelliferylβ-D-glucuronide

免疫荧光技术基本原理

光波长为550nm，最大发射光波长为620nm，呈橙红色荧光。与FITC的翠绿色荧光对比鲜明，可配合用于双重标记或对比染色。其异硫氰基可与蛋白质结合，但荧光效率较低。 （2）其他荧光物质　　1）酶作用后产生荧光的物质某些化合物本身无荧光效应，一旦经酶作用便形成具有强荧光的物质。例如4-甲基伞酮-β-D半乳糖苷受β-半乳糖苷酶的作用分解成4-甲基伞酮，后者可发出荧光，激发光波长为360nm，发射光波长为450nm。其他如碱性酸酶的底物4-甲基伞酮磷酸盐和辣根过氧化物酶的底物对羟基苯乙酸等。　　

浅析染色质免疫沉淀（ChIP）技术在 DNA 与蛋白质相互作用研究中的重要性

或者尚不能得出确切结论，因此需要 ChIP 试验进行有力的支持。有研究 [6] 通过 WB, MSP,EMSA 等技术发现乳腺癌细胞的高度恶性与抑制肿瘤转移相关的 TFPI-2 基因启动子区过度甲基化有关，之后用 ChIP 试验则证实了该区域高度甲基化后确实转录水平因此受到影响，为上述的结论提供更充分的论据。类似的，Peng 等人 [13] 用 EMSA 技术得出水稻转录因子 OsLFL1 结合于 Ehd1 基因的启动子区的初步结论后，采用 ChIP 在体内重复出了这个结果，因此最终能确定该转录