MitoSOX Red Mitochondrial Supe

产品描述

红色线粒体超氧化物荧光探针（MitoSOX Red Mitochondrial Superoxide Indicator，以下简称：MitoSOX Red）是二氢乙啶（DHE）的一种阳离子衍生物，特别设计高度特异性检测活细胞内线粒体超氧化物。

MitoSOX Red是一种特异性靶向活细胞线粒体的新型荧光探针，具细胞膜渗透性，且能快速和选择性结合线粒体。一旦进入线粒体，被超氧化物氧化，与核酸结合后产生很强的红色荧光（见Fig 1）。MitoSOX Red能够立即被超氧化物，而不是其它ROS-或RNS生成系统所氧化。超氧化物歧化酶（SOD）能够预防MitoSOX Red被氧化。

Fig 1. MitoSOX Red与超氧化物阴离子（•O₂^–）的反应机理图

MitoSOX Red由于能直接检测活细胞线粒体超氧化物，从而避免因分离纯化线粒体再进行检测可能存在人为操作引起的误差。MitoSOX Red是一种有价值的工具，能用来筛选多种疾病中调节氧化应激的药物。

产品特征

1） 分子式：C₄₃H₄₃N₃IP

1） 分子量：759.71

2） 外观：固体

3） Ex/Em：~510/580 nm

4） 溶解性：溶于DMSO（5mM）

保存与运输方法

保存：≤-20°C避光干燥保存，收到货至少12个月有效。

运输：冰袋运输。

注意事项

1） 整个操作过程中注意避光。

2） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1. 储存液的配制

使用前，先将本品取出回温至室温，并对其进行简单低速离心使溶液降至管底。之后用13µl高质量无水DMSO溶解MitoSOX Red（50µg/管），混匀后即得到5mM储存液。储存液可根据单次用量分装，≤-20°C避光保存，尽量避免反复冻融。

2. 真核活细胞标记步骤

以下实验步骤是专门开发用于爬片培养的牛肺上皮细胞（BPAE）、MRC5人肺成纤维细胞和小鼠3T3成纤维细胞，其他细胞类型可做适当调整。建议以下步骤仅作起始条件，根据实际需求做优化调整。

2.1 制备5µM MitoSOX Red工作液：用HBSS/Ca/Mg（货号：MS3501-500ML）或适当缓冲液稀释储存液到5µM工作液。

【注意】：MitoSOX Red工作浓度不要超过5µM，否则可能产生细胞毒性效应，包括改变线粒体形态和荧光素重新分配到细胞核和细胞质。

2.2 细胞加载：取1-2ml 5µM MitoSOX Red工作液以覆盖爬片培养的细胞为准。37℃避光孵育10min。

2.3 细胞清洗：用预热的缓冲液轻轻清洗细胞3次。

2.4 准备观察：按需加入复染剂染细胞，之后封片，进行荧光成像（Ex/Em=510/580nm）。