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一、项目介绍
组织中的T细胞是适应性免疫的核心执行者,精准分型有助于解析免疫微环境、疾病发生机制及免疫治疗响应。与外周血T细胞检测不同,组织T细胞检测需先解决组织解离、细胞活性维持、背景干扰消除三大关键问题,再通过标志物组合区分不同功能亚群(如初始T细胞、效应T细胞、调节性T细胞等)。
二、流式仪通道
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激发波长 |
通道 |
发射波长 |
常见染料 |
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488nm蓝色激光器 |
BL1 |
530BP |
FITC、AlexaFluor488等 |
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BL2 |
585BP |
PE、PI、DsRde等 |
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BL3 |
700BP |
PerCP-Cy5.5、PE-Cy5等 |
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BL4 |
785BP |
PE-Cy7等 |
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638nm红色激光器 |
RL1 |
660BP |
APC、AlexaFluor647等 |
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RL2 |
785BP |
APC-Cy7等 |
三、检测步骤

染色标志物:Live/Dead+CD45+CD3+CD4+CD8
四、送检要求
①小鼠血液样本
取材要求:取抗凝全血,不能溶血或凝固,大于100ul/每管测试
运输要求:4度运输,不能用湿冰,防止结冰。用泡沫盒+冰袋运输。
②小鼠脏器样本
取材要求:组织不能小于0.5*0.5cm,切成黄豆大小(或者整个肿瘤组织直接送样),浸泡在含5%FBS的PBS或者HBSS中,体积不低于管子的2/3(例如15ml离心管,缓冲液不能低于10ml),不能切太碎,肿瘤组织送样量需要更多。
运输要求:4度运输,不能用湿冰,防止结冰。用泡沫盒+冰袋运输。
③整鼠样本
取材要求:送小鼠前和实验室明确取材部位及数量,头天送小鼠,第二天安排流式检测(需要确认时间)。
运输要求:活体运输。
五、结果展示


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文献和实验chichao0000 小弟是个出做实验的新兵,问一个比较初级的问题: 计划从活体上去组织,然后检测基因多态性,全部检测,不是针对某个基因,请问各位战友,怎么做呀,是用DNA测序吗?是不是得很贵呀? 望各位战友解答! 感谢! 西门飘脸 基因多态性检测没必要用测序的啊 不是很明白你说的是什么意思 多态性检测,还全部检测,好矛盾啊 suny0354
原位杂交组织化学杂交体检测 杂交体检测又称杂交体显示,是指通过一定方法使杂交反应形成的杂交体(杂交信号)成为在显微镜下可识别的产物。对原位杂交反应信号进行显示的方法因探针标记物不同而异。 (一)放射性核素标记探针的检测 第一个原位杂交实验(1969年)以’H作为核酸探针的标记物,杂交信号用放射自显影术检测。随着原位杂交技术的推广和应用,32P、125I及35S等放射性核素均可用来标记探针,放射自显影技术也一直是用于杂交信号检测的手段之一。 放射
,ILAC),其宗旨是通过提高对获认可实验室出具的检测和校准结果的接受程度,以便在促进国际贸易方面建立国际合作。1996年ILAC成为一个正式的国际组织,其目标是在能够履行这项宗旨的认可机构间建立一个相互承认协议网络。ILAC互认协议的产生是22年努力工作的结晶。ILAC目前有100多名成员,分为正式成员、协作成员、区域合作组织和相关组织等。ILAC目标为: 1) 研究实验室认可的程序和规范; 2)推动实验室认可的发展,促进国际贸易;
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