唾液弯曲杆菌探针法qPCR试剂盒（不含内参）

要想荧光定量 PCR 结果好，这些实验设置要点需记牢

实时荧光定量 PCR 技术（Quantitative Real-time PCR，简称 qPCR）是在 PCR 扩增过程中，通过实时监测荧光信号的变化，达到对待检测样本中初始模板定量分析的方法。当前 qPCR 技术被广泛应用于临床疾病诊断，动物疾病监测，食品安全分析等领域。随着 2020 年新冠疫情在全球的蔓延，qPCR 技术更是因其检测通量高，速度快，操作简便等优势成为新冠病毒核酸检测的有效方法被众人所熟知。 那么为了得到可靠、准确的检测结果，我们需要注意哪些方面呢？其实决定一次实验成功

干货：外泌体研究实操中的常见问题解答

、外泌体 miRNA qPCR 实验选用哪个基因做内参？ 答：外泌体 qPCR 目前没有公认内参基因，本公司检测 miRNA 做的是外参。外参可以最大限度降低对定量实验造成的干扰，适用于内参表达不稳定的外泌体或暂未发现合适内参的其他样品，对目的 microRNA 进行相对定量，替代内参作用。部分文献也会选取U6等作为内参。 16、下游 qPCR 检测时 CT 值过高如何处理？ 答：外泌体 RNA 是微量的存在，首先样品准备阶段确保样品的质量和数量充足（例如血清建议新鲜样本准备 2ml 以上）。有实验

qPCR 实验中遇到这 3 个问题怎么办？

），样本上样量不超过提取试剂盒说明书规定的上限，一般提取的 RNA 质量都是很好的。 ③除此之外，提取的过程中戴一次性干净手套；在单独洁净的区域操作；戴口罩并在操作过程中避免讲话。可有效防止实验者汗液、唾液中的 RNase 污染。 （2）该基因第一次扩增，其 CT 值偏大，而其余基因的 CT 值正常。 这种情况下就需要判定是因为基因的扩增效率低导致的 CT 值偏大，还是基因本身的表达量低造成的 CT 值偏大。 如何判定是因为基因的扩增效率低导致的 CT 值偏大，还是基因本身的表达量低造成的 CT