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- Thermo Fisher
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- 2026年03月27日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20°C 或 -80°C
- 保质期：
见瓶身
- 英文名：
Gateway™ LR Clonase™ II 酶混合物
- 库存：
999
- 供应商：
麦飞生物
- CAS号：
/
- 规格：
20次
Gateway™ LR Clonase™ II 酶混合物催化入门克隆（包含两侧带有 attL 位点的目的基因）和目的载体（包含 attR 位点）之间的体外重组，以生成表达克隆。Gateway™ LR Clonase™ II 是酶和缓冲液的单一混合物，能够以较少的移液步骤方便地设置十微升反应。
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文献和实验的克隆方法将目的基因克隆进入门载体。 （2）混合包含目的基因的入门克隆和合适的目的载体以及Gateway LR Clonase酶，构建表达克隆。（表达克隆用来在合适的宿主中进行蛋白的表达和分析。） 有几种方法可以构建Gateway入门克隆。无论您选择何种方法，创建的入门克隆都是准备用来与各种目的载体进行重组。 （1）PCR克隆（定向TOPO克隆至入门载体或与供载体B×P重组） （2）限制性内切酶消化和连接进入入门载体 （3）使用pCMV•SPORT6或pEXP-AD502*构建
Inducible shRNA Lentiviral Vectors
TE Buffer, pH 8.0 to 8 µl 5 µl 2) Remove the LR Clonase™ II enzyme mix from -20° C and thaw on ice (~ 2 minutes). 3) Vortex the LR Clonase™ II enzyme mix
-iT®病毒，病毒编码靶定荧光素酶（对照）或者Lamin A/C 的shRNA。转导5天后，细胞裂解物进行western blot，使用抗Lamin或者抗β-actin抗体检测。靶定Lamin的shRNA抑制了lamin的表达，但是却不影响β-actin的表达。对照荧光素酶的shRNA对lamin的表达没有影响。 图10 使用pLenti6/ BLOCK-iT™-DEST RNAi载体 使用LR Clonase™ II酶混合物进行一小时的重组
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