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- axdbio
- 上海
- AXDC445
- 2026年03月30日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
BRL 3
- 库存：
100万细胞数
- 供应商：
上海安序达生物科技有限公司
- 肿瘤类型：
详见说明
- 细胞类型：
科研
- 组织来源：
器官
- 物种来源：
人或动物
- 细胞形态：
正常
- 是否是肿瘤细胞：
详见说明
- 器官来源：
详见说明
- 运输方式：
顺丰运输
- 年限：
数年
- 生长状态：
贴壁生长
- 规格：
25T
请收到细胞后，先在培养箱静置3-5小时后，再在倒置镜下(好是在4X物镜)观察整个细胞生长情况。 （一）如果细胞生长愈合度低于70%且细胞未大面积脱落，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出旧培养液，换8-10ml新鲜培养液后继续培养。（二）如果细胞大面积脱落，将细胞继续静置过夜，期间可不进行处理。等待第二天观察细胞，如果细胞大部分恢复贴壁，可参照（一或三处理）；如果细胞少部分贴壁，仍然大部分细胞漂浮，可将细胞悬液通过离心收集，用新鲜完全培养基重新接种至新的培养瓶中，旧培养瓶中的细胞更换新的完全培养基继续培养。
如果细胞愈合度已经超过75%，即可进行传代培养。具体步骤如下： 1. 弃去培养液，用PBS（不含钙,镁离子）洗1-2次。 2. 加0.7ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）（依据细胞消化难易程度可适当增减）于培养瓶中，后轻轻摇晃让消化液充分接触细胞，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，期间间隔5-10s用力拍打瓶壁两侧，等细胞大部分（大于50%）能拍打下来时，可将培养瓶转移至无菌生物安全柜中。 3. 轻轻打匀后吸出一半，分到新的培养瓶中，按6-8ml/瓶补加完全培养基。如果没有特别说明，收到细胞后的次传代一般是一传二。
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文献和实验，5% CO2条件下，保存于加有1%左旋谷氨酰胺、1%青霉素/链霉素、 10% FBS（GIBCO-BRL）、潮霉素（100μg/ml）和G418（geneticin，250μg/ml）的DMEM（GIBCO-BRL）中。 用40 nM siRNA转染细胞，转染48小时后，用TNF-α（33 ng/ml）刺激细胞。RNA分离和逆转录用RNeasy试剂盒在两个独立反应（每个siRNA 2个生物学重复）中从1×107 HLR-CHOP细胞提取总RNA。每次用700 ng总RNA，以及根据厂家指导手册采用寡脱氧
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