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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
Anglne
- 库存:
100万细胞数
- 供应商:
上海安序达生物科技有限公司
- 肿瘤类型:
详见说明
- 细胞类型:
科研
- 组织来源:
器官
- 物种来源:
人或动物
- 细胞形态:
正常
- 是否是肿瘤细胞:
详见说明
- 器官来源:
详见说明
- 运输方式:
顺丰运输
- 年限:
数年
- 生长状态:
贴壁生长
- 规格:
25T
请收到细胞后,先在培养箱静置3-5小时后,再在倒置镜下(好是在4X物镜)观察整个细胞生长情况。 (一)如果细胞生长愈合度低于70%且细胞未大面积脱落,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,吸出旧培养液,换8-10ml新鲜培养液后继续培养。(二)如果细胞大面积脱落,将细胞继续静置过夜,期间可不进行处理。等待第二天观察细胞,如果细胞大部分恢复贴壁,可参照(一或三处理);如果细胞少部分贴壁,仍然大部分细胞漂浮,可将细胞悬液通过离心收集,用新鲜完全培养基重新接种至新的培养瓶中,旧培养瓶中的细胞更换新的完全培养基继续培养。
如果细胞愈合度已经超过75%,即可进行传代培养。具体步骤如下: 1. 弃去培养液,用PBS(不含钙,镁离子)洗1-2次。 2. 加0.7ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)(依据细胞消化难易程度可适当增减)于培养瓶中,后轻轻摇晃让消化液充分接触细胞,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,期间间隔5-10s用力拍打瓶壁两侧,等细胞大部分(大于50%)能拍打下来时,可将培养瓶转移至无菌生物安全柜中。 3. 轻轻打匀后吸出一半,分到新的培养瓶中,按6-8ml/瓶补加完全培养基。如果没有特别说明,收到细胞后的次传代一般是一传二。
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对于贴壁生长的细胞,相对来说比较简单但也很麻烦。以下我主要讨论贴壁生长的细胞。 在讨论之前,大家首先要有一个概念,即洁净区,并不是没有细菌,而是细菌的数量非常少,国家标准100级的洁净标准是浮游菌数不得超过5个每立方米,沉降菌数不得超过1个每培养皿.而国外的标准比我国的还要高一点,要求的数量更少。 所以在我们的洁净操作台里,并不是真正一个细菌都没有的,所以在操作的时候还是要尽量利索迅速地完成操作。尽量减少进入培养体系细菌的数量。 所以处理细菌污染的重要原则就是:无限地稀释细菌的浓度,无限地减少
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