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- axdbio
- 上海
- AXDC047-L/G
- 2026年07月03日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
Capan-2-LUC/GFP
- 库存：
100万细胞数
- 供应商：
上海安序达生物科技有限公司
- 细胞类型：
科研
- 组织来源：
器官
- 物种来源：
人或动物
- 细胞形态：
正常
- 器官来源：
详见说明
- 运输方式：
顺丰运输
- 年限：
数年
- 生长状态：
贴壁
- 规格：
25T
请收到细胞后，先在培养箱静置3-5小时后，再在倒置镜下(好是在4X物镜)观察整个细胞生长情况。 （一）如果细胞生长愈合度低于70%且细胞未大面积脱落，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出旧培养液，换8-10ml新鲜培养液后继续培养。（二）如果细胞大面积脱落，将细胞继续静置过夜，期间可不进行处理。等待第二天观察细胞，如果细胞大部分恢复贴壁，可参照（一或三处理）；如果细胞少部分贴壁，仍然大部分细胞漂浮，可将细胞悬液通过离心收集，用新鲜完全培养基重新接种至新的培养瓶中，旧培养瓶中的细胞更换新的完全培养基继续培养。
如果细胞愈合度已经超过75%，即可进行传代培养。具体步骤如下： 1. 弃去培养液，用PBS（不含钙,镁离子）洗1-2次。 2. 加0.7ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）（依据细胞消化难易程度可适当增减）于培养瓶中，后轻轻摇晃让消化液充分接触细胞，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，期间间隔5-10s用力拍打瓶壁两侧，等细胞大部分（大于50%）能拍打下来时，可将培养瓶转移至无菌生物安全柜中。 3. 轻轻打匀后吸出一半，分到新的培养瓶中，按6-8ml/瓶补加完全培养基。如果没有特别说明，收到细胞后的次传代一般是一传二。
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文献和实验荧光蛋白和荧光素酶是在基因工程中广泛使用的两类报告基因 (reporter gene)，是研究生物分子或细胞活动规律及本质的重要工具。 荧光蛋白 荧光蛋白能被一定波长的光激发，电子被激发到高能级，随后向低能级跃迁的过程中发出比激发光波长更长的荧光。绿色荧光蛋白（GFP）最初是在水母中发现的，随后各种颜色的荧光蛋白被开发出来。目前荧光蛋白按照颜色分类主要分为绿色系、红色系、蓝色系、青色系、黄色系和橙色系（表 1）。这么多的荧光蛋白，可以根据哪些方面来选择呢？ 激发峰/发射峰：每种荧
待检测基因-Luc/Rluc的重组质粒；2、细胞系选择: 根据实验需要选择细胞株，通常选择转染效率较高的293T细胞或原代细胞等；3、共转染: 将带有Luc/Rluc标记的报告基因和目的基因进行共转染，设置不同的检测时间点，一般为24h/48h；4、外界干预: 转染后，可进行物理/化学/病毒等的相应刺激；5、细胞处理: 采用进口/国产双荧光素酶检测试剂盒依照protocol操作；6、荧光检测: 使用GENios Pro 酶标仪或具有类似检测功能的设备进行荧光强度检测。三、荧光素酶报告基因的优点
指标：确认流式细胞仪能检测多少个通道，流式抗体每个通道只能选择1种荧光素。各个通道之间的荧光素可以随意搭配。如实验者同时检测三个指标，可以在下图中绿色、黄色和红色三个通道中各选一个适当的荧光素标记，FITC、PE和PE-cy5。切忌所有指标选择同一个通道的荧光标记，以防止荧光的重叠和相互干扰，影响最后结果。因此，流式细胞仪的通道越多，同一份样本能同时做的表面/胞内标志就越多。常用荧光标记包括FITC, PE, PEcy5, PEcy5.5, APC等。 4、同型对照的选择： 流式细胞
