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- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 库存：
100
- 灵敏度：
详询
- 样本：
血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本
- 标记物：
hrp辣根过氧化物酶
- 适应物种：
小鼠
- 应用：
科研
- 检测方法：
夹心法
- 检测范围：
详见产品手册
- 规格：
48T/96T
| 规格： | 48T | 产品价格： | ￥900.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 96T | 产品价格： | ￥1300.0 |
产品名称：小鼠溶酶体a-甘露糖苷酶-II（MAN2B1）ELISA检测试剂盒
英文名称：Lysosomal alpha-mannosidase
简称：MAN2B1
单位：U/L
准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。
特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
重复性：板内、板间变异系数均小于15%。
贮藏：2-8℃，避光防潮保存。
有效期：6个月。
使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中溶酶体a-甘露糖苷酶-II含量。
实验原理：
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被溶酶体a-甘露糖苷酶-II（MAN2B1）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的溶酶体a-甘露糖苷酶-II（MAN2B1）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。
试剂盒组成：30 倍浓缩洗涤液、酶标试剂、酶标包被板、样品稀释液、显色剂A 液、显色剂 B 液、终止液、标准品、标准品稀释液、产品手册、封板膜、密封袋。
样品收集、处理及保存方法：
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品：
1. 酶标仪（450nm）
2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
操作步骤：
1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户在小试管中进行稀释。
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样，待测样品孔中先加样品稀释液 ，然后再加待测样品（样品最终稀释度为 5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4.配液：将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用。
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此重复 5 次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂，空白孔除外。
7.温育：操作同 3。
8.洗涤：操作同 5。
9.显色：每孔先加入显色剂A，再加入显色剂B，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15 分钟。
10.终止：每孔加终止液，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。 测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。
操作注意事项：
1. 试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
3. 浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照产品手册操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4. 严格按照产品手册中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5. 所有液体组分使用前充分摇匀。
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文献和实验小鼠溶酶体a-甘露糖苷酶-II（MAN2B1）ELISA检测试剂盒
为主，可缓解症状但无法阻止疾病进展，且长期使用易致“开关现象”或异动症。近年策略正转向机制驱动的精准治疗：如靶向α-突触核蛋白的抗体、LRRK2激酶抑制剂及ADORA2A拮抗剂等，探索非多巴胺通路；同时，iPSC来源的多巴胺神经元和脑类器官平台为个体化药物筛选与治疗提供新支撑。 菲恩生物聚焦帕金森病（PD）等神经退行性疾病研究，提供高纯度、高活性的关键靶点蛋白（如α-突触核蛋白、LRRK2、GBA1等）、疾病相关生物标志物及配套ELISA检测试剂盒，全面支持PD发病机制解析、分子分型、生物
、溶酶体与疾病 各类贮积症 台-萨氏综合征（Tay-Sachs diesease）：溶酶体缺少氨基已糖酯酶A，导致神经节甘脂GM2积累。 II型糖原累积病（Pompe病）：缺乏α-1,4-葡萄糖苷酶，糖原在溶酶体中积累。 Gaucher病：缺乏β- 葡萄糖苷酶，葡糖脑苷脂沉积。 细胞内含物病（inclusion-cell disease）：N-乙酰葡糖胺磷酸转移酶单基因突变。高尔基体中加工的溶酶体前酶上不能形成M6P分选信号，病人成纤维细胞的溶酶体中没有水解酶，底物在溶酶体中贮积，形成
）的Human IL6 ELISA READY-SET-GO 盒，商家推荐操作流程为：1用包被抗体包被酶联板（4度过夜）→2洗三遍（第I洗）→3加入阻断缓冲液（通常为含10%小牛血清或5%脱脂奶粉的洗液），室温下放置1小时→4洗三遍（第II洗）→5加入样本，室温下放置1小时→6洗五遍（第III洗）→7加入检测抗体（生物素标记），室温下放置1小时→8洗五遍（第IV洗）→9加入亲合素标记的HRP反应液，室温下放置半小时→10洗七遍（第V洗）→11加入酶底物显色→12终止反应→13用酶联仪读板。在此流程中前后共有
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