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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 英文名:
Dynabeads Protein G
- 保质期:
2年
- 供应商:
上海宾智生物科技有限公司
- 保存条件:
2-8度
- 规格:
10003D-1ml/10004D-5ml/10009D-50ml
| 规格: | 10003D-1ml | 产品价格: | ¥1800.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 10004D-5ml | 产品价格: | ¥5800.0 |
| 规格: | 10009D-50ml | 产品价格: | ¥52000.0 |
Dynabeads 蛋白 G 为表面共价偶联有重组蛋白 G(∼17 kDa)的 2.8 µm 均匀超顺磁性微珠。Dynabeads 蛋白 G 为免疫沉淀(IP)提供了可替代 Sepharose 或琼脂糖浆的出色替代产品,手动和自动方案均可用。
•在不到40分钟内完成 IP
• 高靶蛋白得率和低抗体消耗
• 极低非特异性结合及高信噪比
• 无需色谱柱、离心步骤或耗时的预清洗步骤
•高重现性和高通量与 KingFisher 仪器兼容
可快速且简便的进行手动 Dynabeads 分离
手动方案简单且可在40分钟内完成。首先,靶蛋白的抗体与 Dynabeads 蛋白 G 在试管中孵育 10 分钟。通过将试管置于 DynaMag 磁力架中并去除上清液,洗去过量抗体。然后,抗体包被磁珠可用于多种下游应用,包括 IP、Co-IP、染色质 IP (ChIP)、RNA IP (RIP)、小规模 IgG 纯化和蛋白纯化。由于 Dynabeads 的独特磁性,使用 DynaMag 磁力架可轻松收集结合材料。磁珠上的重组蛋白 G 不含白蛋白结合位点,因此在程序中不会共纯化白蛋白。IP 速度快,并且具有高得率、高重现性且非特异性结合极少,因此无需预清洗步骤。
自动 Dynabeads 分离有助于提高通量并缩短手动操作时间
如果您并行处理多份样品,洗涤步骤数量和手动操作时间会与样品数量成比例地增加。一次处理多个样品时,移液管及其他手动操作获得的结果往往不如自动化。为了更好地处理中等至高通量的样品,减少手动操作时间并确保可重现性较高,我们开发了适用于 KingFisher Flex 和 KingFisher Duo Prime 仪器的 IP 方案。自动化方案复制人工方案,从而获得同样高的靶蛋白产率以及相同的低非特异性结合和高可重现性。无论您要处理 10 个还是 96 个样品,IP 方案可在 40 分钟内完成。’只需将试剂加载到孔板上,按下“开始”按钮,到您准备好下游分析时,IP 即可完成。根据抗体和靶蛋白的丰度和/或特异性,可能需要进行一些优化(例如,孵育时间)。
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文献和实验浅析染色质免疫沉淀(ChIP)技术在 DNA 与蛋白质相互作用研究中的重要性
染色质免疫沉淀(ChIP)是研究蛋白质-DNA 相互作用的一项强大技术,广泛用于多个领域的染色质相关蛋白的研究(如组蛋白及其异构体,转录因子等),特别适用于已知启动子序列或整个基因位点的组蛋白修饰分析研究。这项技术采用特定抗体来富集存在组蛋白修饰或者转录调控的 DNA 片段,通过多种下游检测技术(定量 PCR ,芯片,测序等)来检测此富集片段的 DNA 序列。 ChIP 技术自诞生之后,已成功的应用于人或动物细胞和组织 [1] 、植物组织 [2] 、酵母 [3] 以及细菌、质粒
,选择膜蛋白B来做阴性对照,只要确认二者之间没有相互作用;而做胞质可溶性蛋白C的免疫沉淀,则选择另外一个可溶性蛋白D来做阴性对照。同时,为避免Protein A或者G beads有(非)特异性吸附从而造成免疫沉淀实验结果的假阳性,一般在加入目的蛋白抗体之前,预先将Protein A或者G beads与细胞裂解液孵育数小时,然后取上清用于后续的抗体-agarose beads孵育。 同时,Protein A或者G beads对不同类型的抗体亲和力不同,结合一抗的种属和Ig亚型,选择合适
含有的去污剂,树脂能够从蛋白水溶液和肽样本中去除自由的,未结合的阴离子的,非离子或两性离子的去污剂 (e.g. SDS, Triton® X-100 或 CHAPS),同时对于下游进行的质谱或其他技术的分析应用带来最小的样本丢失。 DetergentOUT™ GB-S10 柱子在第三方的研究使用中表明完全兼容 DI-QTOF 和 LC-MS/MS(请见参考文献)。DetergentOUT™ GB-S10 柱子的使用显著增加到了检测到的肽光谱的数量。除此之外,DetergentOUT™ GB
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