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100 UL
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文献和实验which employs goat anti-Rabbit HRP.12. Wash filter 3 times 7 minutes with 0.5% BSA in TBST.13. Perform Alkaline phosphatase reaction using NBT and BCIP substrates. I find that CREB usually comes up within several minutes of adding the AP substrates
% nonfat dry milk works well for anti-PCREB, but in my hands milk is not as good as BSA from USB (it seems to mask the epitope). Remove block solution and add primary antibody. For antiphosphoCREB (IgG, 0.7 mg/ml), I use 1:5,000
指仅对一种抗原决定基的纯粹的抗体。这类抗体不可能通过将抗原 胞的 Hybridoma,在试管内制成了纯粹的单克隆抗体。用某种抗原使动物产生免疫感应,对应于抗原之不同部分可制成各种不同的抗体复合体。然而,因为一个产生抗体的细胞,只能产生一种抗体,所以骨髓肿瘤细胞与产生抗体细胞间的细胞杂种,可形成边产生抗体边增殖的 hybridoma,将每个杂种细胞进行克隆(无性繁殖系)培养,则一个克隆的细胞群只由单种类产生同一抗体的细胞所组成,这样得到的就是单克隆抗体。此抗体在测定
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